Dosage plasmatique de quatre anticoagulants directs par UHPLC/DAD - 19/10/16
Development and validation of a common dosage method in plasma to four direct anticoagulants (apixaban, dabigatran, rivaroxaban and edoxaban) using UHPLC-DAD
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Résumé |
Objectifs |
Les anticoagulants oraux directs (AOD) sont des inhibiteurs directs et réversibles du facteur Xa de la coagulation (apixaban, edoxaban et rivaroxaban) et de la thrombine (dabigatran). Ces médicaments ne nécessitent pas de suivi biologique de routine durant la période de traitement. Cependant, certaines situations requièrent l’évaluation de leur activité anticoagulante, notamment en cas d’hémorragie ou de nécessité de chirurgie d’urgence. Leur activité anticoagulante n’est pas corrélée aux résultats des tests de coagulations classiques, mais peut être évaluée par la mesure des concentrations plasmatiques. Une méthode de dosage commune à ces quatre molécules a été développée.
Méthode |
Après extraction en phase solide d’1mL de plasma (cartouches HLB 3 cc, 60mg, Oasis®, Waters), les AOD sont dosés en UHPLC-DAD, sur une colonne Waters BEH C18 (150mm×2,1mm×1,7μm) en utilisant un gradient de phase mobile tampon d’acétate d’ammonium (5mM, pH=6,4)/acétonitrile.
Résultats |
La technique de dosage des 4 AOD a été validée sur une gamme de concentration de 20 à 400ng/mL pour l’apixaban, l’edoxaban et le rivaroxaban et de 20 à 300ng/mL pour le dabigatran. La limite de quantification est de 20ng/mL. Le délai de rendu des résultats est inférieur à 1h.
Conclusions |
Les performances de la technique sont compatibles avec un usage hospitalier en termes de délai d’analyse, de facilité de réalisation et de matériel. La technique développée permet d’apporter rapidement des informations au clinicien sur le risque hémorragique du patient et de l’orienter sur la prise en charge à entreprendre.
Le texte complet de cet article est disponible en PDF.Summary |
Aims |
Direct oral anticoagulants (DOACs) are direct reversible inhibitors of coagulation factor Xa (apixaban and rivaroxaban edoxaban) or thrombin (dabigatran). They do not need routine laboratory monitoring during treatment, but some situations require assessment of their anticoagulant activity, especially in case of bleeding or ahead of emergency surgery. Their anticoagulant activity does not correlate well with conventional coagulation tests, but can be evaluated from plasma concentration. A single assay for all 4 molecules has been developed.
Method |
After 1mL plasma solid phase extraction (HLB 3cc cartridges, 60mg, Oasis®, Waters), DOACs were assayed in UHPLC-DAD on a Waters BEH C18 column (150mm×2.1mm×1.7μm) using a mobile-phase gradient of ammonium acetate buffer (5mM, pH=6.4)/acetonitrile.
Results |
The assay was validated for the four DOACs, over a concentration range of 20–400ng/mL for apixaban, rivaroxaban and edoxaban and 20–300ng/mL for dabigatran. The limit of quantification was 20ng/mL. Results were obtained in less than 1hour.
Conclusions |
The performance of the technique was consistent with hospital applications in terms of analysis time, ease of execution and equipment. The technique gives the clinician quick access to information on bleeding risk, enabling the patient to be advised on appropriate medical.
Le texte complet de cet article est disponible en PDF.Mots clés : Apixaban, Dabigatran, Edoxaban, Rivaroxaban, Chromatographie liquide, Extraction en phase solide
Keywords : Apixaban, Dabigatran, Edoxaban, Rivaroxaban, Liquid chromatography, Solid phase extraction
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