Établissement d'une lignée cellulaire stable et continue de mélanome choroïdien humain constituant un nouveau modèle d'étude in vitro et in vivo du phénotype de multichimiorésistance. - 08/03/08
JS Rouillot,
JD Grange,
L (Lyon) Baggetto
But. Nous avons établi in vitro une lignée cellulaire stable de mélanome de l'uvée (nommée MU2) présentant le phénotype de mutichimiorésistance typique (MDR).
Matériel et Méthode. La lignée MU2 a été obtenue à partir d'un explant de mélanome choroïdien épithélioïde opéré dans le service et cultivée maintenant depuis plus de 2 ans dans du milieu RPMI – 1640 en présence de 10 % de sérum de veau foetal. Afin de constituer un modèle in vivo , 30 millions de cellules MU2 ont été injectées dans la cavité péritonéale de 4 souris balb/cBY/J – nude.
Cette injection a permis d'obtenir dans 1 cas une tumeur sous-cutanée au point d'injection associée à une masse hépatique métastatique. Les cellules de cette masse métastatique ont été remises en culture, ceci ayant permis d'obtenir la lignée MU2F. Les temps de doublement in vitro et in vivo des lignées MU2 et MU2F ont été calculés.
Nous avons testé de manière semi-quantitative la présence de protéines impliquées dans le phénotype MDR sur les 2 modèles cellulaires MU2 et MU2F par RT-PCR à partir des ARN cellulaires d'une part et par l'utilisation d'anticorps monoclonaux (DOT-BLOT) d'autre part.
Résultats. Le temps de doublement de la lignée MU2F à été calculé comme égal à 18 heures sur 3 expériences indépendantes donc inférieur à celui de la lignée d'origine MU2 égal à 20 heures.
MU2 et MU2F expriment des niveaux élevés de LRP (Lung resistance protein) et de MRP (Multi-Drug related protein) mais n'expriment pas la PGP (P-glycoprotein).
Commentaire et Conclusions. MU2 et MU2F constituent un modèle d'étude précieux non seulement pour caractériser la chimiorésistance de mélanome de l'uvée mais aussi pour évaluer l'efficacité de nouvelles thérapeutiques de « chimiosensibilisation ».
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Vol 25 - N° 5
P. 75 - avril 2002 Retour au numéroBienvenue sur EM-consulte, la référence des professionnels de santé.