Nous avons mis en évidence que la déplétion lymphocytaire B par l’anti-CD20 induisait un processus de différenciation plasmocytaire dans la rate chez l’homme et chez la souris dans le modèle AID-Cre-EYFP. Nous avons donc souhaité déterminer les mécanismes sous-jacents responsables de la différenciation et/ou du maintien des PC dans la niche splénique dans le contexte de déplétion B chez la souris. Nous avons utilisé le modèle de souris transgénique AID-Cre-ERT2×Rosa26-loxP-EYFP qui permet de marquer irréversiblement par la protéine EYFP les cellules B lors de leur passage dans un centre germinatif au cours d’une réponse immune après injection de tamoxifène. Les PC qui se sont différenciés à partir de ces cellules B conservent le marquage EYFP, permettant de les identifier, de les dater et de les suivre in vivo.

Les plasmocytes de longue durée de vie résident dans une niche spécifique contenant des facteurs de survie favorables à leur maintien. En situation normale, les PLDV résident dans la moelle qui contient des cellules stromales, des éosinophiles et des facteurs solubles tels que CXCL12, a proliferation-inducing ligand (APRIL) et IL-6, qui agissent de façon synergique pour assurer le maintien des PLDV. Dans le contexte de déplétion B, nous avons pu identifier plusieurs facteurs nécessaires à la survie des PC dans la rate. De même que chez l’homme, nous avons observé une augmentation du taux de B-cell activating factor (BAFF), un facteur essentiel à la survie des cellules B, à la fois dans le sérum et les surnageants spléniques après traitement par anti-CD20. In vivo, la combinaison des anticorps anti-CD20 et anti-BAFF a permis d’obtenir une diminution drastique (fold>5, p<0,001) du nombre de plasmocytes de longue vie EYFP+ dans la rate comparé à la condition anti-CD20 seule, signifiant un rôle majeur de BAFF dans le maintien des PC dans la niche splénique dans le contexte de déplétion B. Au niveau de la moelle, le nombre de PC EYFP+ était aussi diminué d’un facteur deux, mais portant majoritairement sur les IgM+, nous n’avons pas observé d’hypogammaglobulinémie IgG. Les granuleux Gr1+ co-localisent dans la pulpe rouge de la rate avec les PC EYFP+. Leur nombre, ainsi que leurs interactions avec les PC EYFP+, augmentent dans le contexte de déplétion B. De plus, nous avons identifié les neutrophiles Gr1+Ly6G+ comme la principale source de production de BAFF dans la rate, suggérant un possible rôle dans la niche de survie plasmocytaire.

Enfin, les T CD4+ interagissent également de façon étroite avec les PC EYFP+ de la rate. En les déplétant spécifiquement in vivo, associé à la déplétion B, nous avons observé une diminution (fold>2, p<0,05) du nombre de PC EYFP+ spléniques, signifiant leur participation au maintien des PC dans la niche splénique. Les tests de déplétion des T CD4+ seuls in vivo et de co-culture in vitro des PC avec les T CD4+ suggèrent que les T CD4+ dans le contexte de déplétion B ont un meilleur effet sur la survie des PC que les T CD4+ issus de rate de souris non traitées. Ceci signifierait que les T CD4+ reçoivent des signaux différents provenant du milieu splénique après traitement par anti-CD20, confortant l’observation de modifications de l’environnement induites par la déplétion B.

En conclusion, nos résultats suggèrent qu’inhiber les facteurs de survie de la niche plasmocytaire, en particulier en utilisant l’anticorps anti-BAFF, dans le contexte du traitement par anti-CD20 permet d’interférer sur le processus de différenciation paradoxale des plasmocytes. Dans cette optique, la combinaison anti-CD20+anti-BAFF pourrait être bénéfique dans le traitement des cytopénies auto-immunes, voire plus largement au cours des maladies auto-immunes.