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Differentiation of human dendritic cell subsets for immune tolerance induction - 04/02/18

Différenciation de cellules dendritiques humaines pour l’induction de la tolérance immune

Doi : 10.1016/j.tracli.2017.08.002 
N. Deluce-Kakwata-nkor a, L. Lamendour a, V. Chabot b, A. Héraud a, Z. Ivanovic c, F. Halary d, e, F. Dehaut b, F. Velge-Roussel a, f,
a EA 4245 cellules dendritiques, immuno-modulation et greffes, université François-Rabelais de Tours, UFR de médecine, 10, boulevard Tonnellé, 37032 Tours cedex, France 
b Service recherche du laboratoire d’histocompatibilité et d’immunogénétique, établissement français du sang Centre-Atlantique, 2, boulevard Tonnellé, BP 40661, 37206 Tours cedex 3, France 
c EFS Aquitaine-Limousin, place Amélie-Raba-Léon, CS 21010, 33075 Bordeaux, France 
d UMR 1064, Inserm, centre de recherche en transplantation et immunologie (CRTI), université de Nantes, Nantes, France 
e Institut de transplantation urologie néphrologie (ITUN), Hôtel-Dieu, CHU de Nantes, 30, boulevard Jean-Monnet, 44093 Nantes cedex 01, France 
f UFR des sciences pharmaceutiques, avenue Monge, 37000 Tours, France 

Corresponding author. EA 4245 cellules dendritiques, immuno-modulation et greffes, UFR de médecine, université François-Rabelais, 10, boulevard Tonnellé, 37032 Tours cedex, France.

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Abstract

Objectives

Since no further progress was achieved, in order to improve the long-term organ transplantation outcome, the immune tolerance appears as an interesting therapeutic goal. Dendritic cells (DCs) are specialized cells participating in the homeostasis of the immune response. Moreover, subsets of DCs, identified in humans, appear to have their respective competences in immune response modulation. Our objective is to purify from PBMC or to differentiate DC subsets from monocytes using several strategies and evaluate their IL10 secretion.

Methods

CD14+ cells were purified from peripheral blood mononuclear cell (PBMC) by affinity beads and cultured with cytokines up to 7 days. The pDCs were purified with anti-BDCA-2 beads from PBMC fraction enriched by Percoll® gradient. The moDCs, pDCs and moLCs subsets were analyzed by phenotype labelling and FACS analyses and IL10 secretion measured by ELISA.

Results

The moDCs were characterized by the CD209 expression and a lower expression of CD1a markers. Expression of CD207 and CD1a markers characterized moLCs and CD123+/BDCA-2+ pDCs. Variable IL-10 secretions were shown between the three DC subsets, both at basal and activated levels.

Conclusions

As the several DC populations studied have different capacities of IL-10 synthesis, they might play, among others, distinct roles in the induction of immune tolerance.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Résumé

Objectifs

L’induction de tolérance immune reste un challenge important dans le domaine de la transplantation d’organe. Les cellules dendritiques (DCs), piliers de la réponse immunitaire, jouent un rôle crucial aussi bien dans l’induction d’une immunité spécifique que dans celle d’une tolérance immune. Chez l’homme, il existe au moins quatre types de DCs effectrices majeures, les DCs conventionnelles (cDC), les DCs plasmacytoïdes (pDCs), les DCs inflammatoires (MoDCS) et les cellules de Langerhans (LCs). L’objectif du projet est de préparer différents sous-types de DCs (moDCs, pDCs, moLCs) afin d’analyser leurs capacités à synthétiser de l’IL-10.

Méthodes

La différenciation des moDCs et moLCs est faite à partir de monocytes CD14+ isolés des PBMCs, en présence de cytokines spécifiques. La purification des pDC est faite avec des billes anti-BDCA-2 à partir des PBMC.

Résultats

Les moLCs différenciées sont caractérisées par l’expression de la Langerine (CD207) et de CD1a. Les moDCs se caractérisent par l’expression de CD209 et une plus faible expression de CD1a et les pDCs par l’expression conjointe de CD123 et BDCA-2. La synthèse d’IL10 est différente entre les trois sous-types de DCs étudiés au niveau basal comme activé.

Conclusions

Les différentes populations de DC étudiées, parce qu’elles présentent des capacités variées, entre autres, pour la synthèse d’IL-10, pourraient jouer des rôles distincts dans l’induction de tolérance immune.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Keywords : Dendritic cells, DC subsets, Immuno-modulation, IL-10

Mots clés : Cellules dendritiques, Sous-types de DCs, Immunomodulation, IL-10


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