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Establishment of a model of LPS-induced inflammatory injury in human aortic endothelial cells - 27/04/24

Doi : 10.1016/j.biopha.2024.116576 
Yan Zhang a, , 1 , Yudi Feng a, 1 , Suoni Zhou a, Shuochen Gao c, Bo Xiong a, Xueyan Gao a, Yi Song a, Lin Liu a, b, , Chengzeng Wang a, b, , Ying Yang c,
a Department of Ultrasound, The First Affiliated Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou, Henan 450052, China 
b Henan Institute of Interconnected Intelligent Health Management, The First Affiliated Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou, Henan 450052, China 
c Department of Neurology, The First Affiliated Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou, Henan 450052, China 

Corresponding authors.⁎⁎Corresponding authors at: Department of Ultrasound, The First Affiliated Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou, Henan 450052, China.Department of Ultrasound, The First Affiliated Hospital of Zhengzhou UniversityZhengzhouHenan450052China

Abstract

Purpose

We aim to establish an LPS-induced human aortic endothelial cells (HAECs) inflammatory injury model and explore the optimal conditions for inducing its injury. We expect to provide modeling references for the related experiments of vascular inflammatory diseases.

Methods

HAECs were cultured in vitro and treated with different concentrations of lipopolysaccharide (LPS) (0.1, 1, 10, 50, 100 μg/mL) for 6, 12, and 24 h to establish the HAECs inflammatory injury model. The cell viability was determined by CCK-8 assay; the expression levels of inflammatory cytokines in the cells were detected by RT-PCR;the apoptosis rate of the cells was detected by flow cytometry.

Results

① Within 24 h of LPS treatment, the cell viability of the 0.1 and 1 μg/mL groups showed an overall increasing trend with time, while the cell viability of the 10, 50, and 100 μg/mL groups increased first and then decreased with time, and the cell viability of 50 and 100 μg/mL groups was significantly lower than the normal control group at 24 h (P<0.01). ② RT-PCR results showed that after 50 and 100 μg/mL LPS for 24 h, the inflammatory cytokines all showed an apparent upward trend compared with the normal control group (P<0.05), which was more significant in the 100 μg/mL group. ③ After 100 μg/mL LPS for 24 h, the apoptotic necrosis rate of HAECs was higher than the normal control group (P<0.01).

Conclusions

This experiment successfully established a HAECs injury model, indicating that the optimal conditions for inducing injury are an LPS concentration of 100 μg/mL and a treatment time of 24 h.

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Graphical Abstract




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Highlights

Vascular inflammation model is the basis for the study of many vascular diseases.
Utilizing LPS to establish an inflammatory injury model in human aortic endothelial cells.
The cell viability was increased at the early stage of LPS treatment.
When the concentration of LPS was 100 μg/mL and the treatment time was 24 h, the cell viability was decreased, the inflammatory indexes were increased, and the mortality rate was low.

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Keywords : Endothelial cells, Cell injury, LPS, Inflammation, Cardiovascular disease


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Vol 174

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