Tissue transglutaminase antibodies in celiac disease, comparison of an enzyme linked immunosorbent assay and a dot blot assay

Aims. - The purpose of our study is to determine the sensitivity, specificity and predictive values of an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and a dot blot assay for the detection of IgA class anti-tissue transglutaminase antibodies (IgA-AtTGA) and to compare these results with those of IgA class anti-endomysium antibodies (IgA-AEA), IgA class anti-reticulin antibodies (IgA-ARA) and IgA class anti-gliadin antibodies (IgA-AGA).

Patients. - Serum samples from 143 patients (97 children, 46 adults) with untreated celiac disease (CD) confirmed by intestinal biopsy and 74 disease controls (64 children, 10 adults) were studied.

Methods. - The anti-tissue transglutaminase antibodies were detected by dot blot assay and an ELISA using guinea pig tissue transglutaminase (gp-tTG) as antigen. The anti-endomysium antibodies were detected by an indirect immunofluorescence technique on cryostat sections of human umbilical cord. The anti-reticulin antibodies were also investigated by indirect immunofluorescence on cryostat sections of kidney, liver and stomach of rat. The anti-gliadin antibodies were determined by an ELISA.

Results. - The sensitivity of an ELISA for the detection of anti-tissue transglutaminase antibodies was 86% in children and 87% in adults and the sensitivity of dot blot assay was 57% in children and 54% in adults. The specificity of an ELISA and dot blot for the detection for anti-tissue transglutaminase antibodies was, respectively, 96% and 88% lower than that of anti-endomysium antibodies (100%). The sensitivity of anti-gliadin antibodies was 97% in children and 91% in adults and their specificity was 85%. The sensitivity of anti-reticulin antibodies was 94% in children and 87% in adults. Their specificity was 100%.

Conclusions. - The sensitivity and specificity of an ELISA for the detection of anti-tissue transglutaminase antibodies were better than that of dot blot assay.

However, this dot blot assay could screen four celiac patients who have not had anti-tissue transglutaminase antibodies by an ELISA. The sensitivity of anti-endomysium antibodies was better than that of anti-tissue transglutaminase antibodies, anti-reticulin antibodies and anti-gliadin antibodies but in children aged less than 2 years, the sensitivity of anti-gliadin antibodies was better than that of anti-tissue transglutaminase antibodies.

Objectif. - Notre travail consiste d'une part à déterminer la sensibilité, la spécificité et les valeurs prédictives positive et négative de la technique immunoenzymatique ELISA et de la technique dot blot pour la recherche des anticorps anti-transglutaminase tissulaire d'isotype IgA et d'autre part, de comparer ces résultats à ceux des anticorps anti-endomysium d'isotype IgA, anticorps anti-réticuline d'isotype IgA et anticorps anti-gliadine d'isotype IgA.

Matériel. - Nous avons étudié 143 sérums prélevés chez des patients (97 enfants, 46 adultes) ayant une maladie coeliaque non traitée et confirmée à l'histologie et 74 sérums prélevés chez un groupe témoin (64 enfants, 10 adultes).

Méthodes. - Les anticorps anti-transglutaminase tissulaire sont recherchés par les techniques ELISA et dot blot en utilisant la transglutaminase extraite à partir de foie de cobaye. Les anticorps anti-endomysium sont recherchés par technique d'immunofluorescence indirecte sur coupes de cordon ombilical humain. Les anticorps anti-réticuline sont recherchés par technique d'immunofluorescence indirecte sur coupes de rein, foie et estomac de rat. Les anticorps anti-gliadine sont recherchés par technique ELISA.

Résultats. - La sensibilité de la technique ELISA pour la recherche des anticorps anti-transglutaminase tissulaire est de 86 % chez l'enfant et 87 % chez l'adulte. La sensibilité de la technique dot blot est de 57 % chez l'enfant et 54 % chez l'adulte. La spécificité des techniques ELISA et dot blot pour la recherche des anticorps anti-transglutaminase tissulaire est de 96 % et 88 % respectivement, plus faible que celle des anticorps anti-endomysium (100 %). La sensibilité des anticorps anti-gliadine est 97 % chez l'enfant et 91 % chez l'adulte et la spécificité est de 85 %. La sensibilité des anticorps anti-réticuline est 94 % chez l'enfant et 87 % chez l'adulte, leur spécificité est de 100 %.

Conclusions. - La technique ELISA pour la recherche des anticorps anti-transglutaminase tissulaire a une meilleure sensibilité et une meilleure spécificité que la technique dot blot, mais cette dernière nous a permis de dépister quatre cas de malades coeliaques n'ayant pas d'anticorps anti-transglutaminase tissulaire par technique ELISA. La sensibilité des anticorps anti-endomysium est meilleure que celle des anticorps anti-transglutaminase tissulaire, anticorps anti-réticuline et anticorps anti-gliadine mais les anticorps anti-gliadine ont une sensibilité meilleure que celle des anticorps anti-transglutaminase tissulaire chez l'enfant âgé de moins de deux ans.