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NASBA (nucleic acid sequence-based amplification)

[90-60-0240]
Isabelle Vassias : Ingénieur
CNRS ESA 7060, centre universitaire des Saint-Pères, 45 rue des Saints-Pères, 75006 Paris  France

Résumé

La technique NASBA (nucleic acid sequence-based amplification) est une technique isotherme d'amplification d'ARN inspirée du processus transcriptionnel observé chez les virus et les cellules. Un ARN cible est recopié en son ADN complémentaire à l'aide d'une transcriptase inverse. Une RNase H permet l'élimination de l'ARN, puis l'ADNc est transcrit en ARN à l'aide d'une ARN polymérase. Ce processus aboutit en quelques cycles à une amplification d'environ 100 fois la quantité d'ARN présente dans l'échantillon. Cette méthode peut être rendue quantitative par l'introduction de contrôles internes dans l'échantillon. Le fait qu'elle soit isotherme la rend plus économique que la PCR classique. Elle est actuellement appliquée au diagnostic de certains virus comme le VIH ou le VHC.

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