Etude du mécanisme d'action antivirale de la ribavirine dans le modèle du virus de la diarrhée bovine

En l'absence de modèle de culture cellulaire du virus de l'hépatite C (VHC), le but de notre étude était d'évaluer l'hypothèse du mécanisme d'action de mutagenèse létale de la ribavirine, analogue de la guanosine, dans le modèle du virus de la diarrhée bovine (BVDV).

Nous avons évalué la capacité d'inhibition de la réplication du BVDV par la ribavirine en suivant l'inhibition de l'apparition de l'effet cytopathique de la souche NADL (National Animal Disease Laboratory) cytopathique du BVDV en culture de cellules BT (bovine turbinate, cellules intestinales bovines). Ensuite, nous avons amplifié par RT-PCR les régions 5'NTR et NS5B du génome du BVDV dans les surnageants provenant de cultures cellulaires infectées, traitées ou non par la ribavirine, puis séquencé les produits amplifiés afin de déceler d'éventuelles mutations.

Au niveau phénotypique, la ribavirine était capable d'inhiber la réplication du BVDV de façon d'autant plus puissante qu'elle était ajoutée tôt par rapport à l'inoculation virale. Ces résultats sont en faveur d'un effet antiviral direct de la ribavirine sur le BVDV à une étape précoce du cycle viral. Au niveau génotypique, la ribavirine a diminué le taux d'ARN viral.

Nous avons montré que la ribavirine exerce un effet inhibiteur direct sur la réplication du BVDV. Ces résultats pourraient expliquer l'effet synergique de la ribavirine et de l'interféron lors d'une bithérapie chez les malades porteurs chroniques du VHC. Cet effet demande à être confirmé avec les réplicons sous génomiques du VHC récemment disponibles.

Due to the absence of a cell culture model for HCV, this study evaluated the hypothesis of lethal mutagenic activity of the guanosin analogue ribavirin in HCV, using the BVDV model.

First the capacity of ribavirin to inhibit BVDV replication in cell culture was studied. We then amplified by RT-PCR the 5'NTR and NS5B regions of BVDV in the supernatants of BVDV-infected cell cultures treated with increasing concentrations of ribavirin. The PCR products were then sequenced to detect potential mutations.

At a phenotypic level, the inhibition of BVDV replication by ribavirin was most potent when ribavirin was administered soon after BVDV inoculation. These results show a direct antiviral effect of ribavirin on BVDV at an early stage of the viral cycle. At a genotypic level, ribavirin decreased viral RNA levels.

This study shows that ribavirin directly inhibits BVDV replication. These results could explain the synergistic effect of ribavirin and IFN in combined therapy in chronic carriers of HCV. This effect must be confirmed with subgenomic replicons of HCV.