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Cardiomyocyte function after burn injury and lipopolysaccharide exposure: Single-cell contraction analysis and cytokine secretion profile - 25/08/11

Doi : 10.1016/j.jamcollsurg.2004.05.066 
Andreas D. Niederbichler, MD, Julia Donnerberg, BS, Margaret Westfall, PhD, Martin Erdmann, BS, Kyros Ipaktchi, MD, Peter Vogt, MD, Saman Arbabi, MD MPH, Grace Su, MD, Stewart Wang, MD, PhD : FACS, Mark Hemmila, MD
University of Michigan Medical School Ann Arbor, MI, USA 

Abstract

Introduction: A component of multiorgan dysfunction in burned patients is heart failure. Burn trauma has been shown to induce cytokine synthesis of IL-6, IL-1-beta, and TNF-alpha which can negatively impact cardiac function. We examined the effect of burn injury and lipopolysaccharide (LPS) exposure on cardiomyocyte contraction and cytokine secretion.

Methods: Rats underwent a full-thickness 30%TBSA scald or sham burn. At 1,6,12 and 24 hours post-burn cardiomyocytes were isolated, plated at 50,000 cells/well, and incubated with 0, 1, 10, 25, and 50 micrograms/ml LPS for 18 hours. Supernatants were assayed by ELISA for IL-6, IL-1-beta, and TNF-alpha. Sarcomere length during contraction was recorded using a variable rate video camera with length detection software.

Results: Peak relative sarcomere shortening was decreased in the burn vs. sham group at 1, 6, 12, and 24 hours post-burn (p < 0.003, ANOVA). Exposure of cardiomyocytes to LPS resulted in a decrease in sarcomere shortening at 1, 6, 12, and 24 hours independent of burn status (p < 0.03, ANOVA). Cytokine secretion was not increased by exposure to LPS. IL-6, IL-1-beta, and TNF-alpha levels were increased in cardiomyocytes harvested 1 hour post-burn compared to sham controls (p < 0.05, t-test). There was no difference in cytokine levels between the burn and sham group at 6, 12, and 24 hours post-burn regardless of LPS dose.

-
Hr LPS ug/ml IL-6 pg/ml  IL-1 pg/ml  TNF alpha pg/ml 
Sham Burn Sham Burn Sham Burn 
389 ± 32 942 ± 209 46 ± 13 111 ± 9 32 ± 5 53 ± 2 
389 ± 44 988 ± 195 47 ± 14 105 ± 12 33 ± 5 55 ± 4 
10 349 ± 43 937 ± 172 45 ± 9 104 ± 10 32 ± 5 50 ± 3 
25 365 ± 49 979 ± 207 51 ± 12 109 ± 13 32 ± 5 53 ± 4 
50 351 ± 39 1070 ± 253 46 ± 7 114 ± 16 32 ± 5 53 ± 5 
523 ± 81 453 ± 44 41 ± 8 47 ± 7 27 ± 1 28 ± 4 
492 ± 78 420 ± 54 43 ± 11 48 ± 8 25 ± 0 28 ± 4 
10 543 ± 98 483 ± 48 31 ± 3 44 ± 7 26 ± 1 28 ± 4 
25 577 ± 101 466 ± 67 45 ± 10 65 ± 11 26 ± 1 28 ± 4 
50 526 ± 97 448 ± 44 39 ± 7 56 ± 10 25 ± 1 28 ± 4 
12 743 ± 161 882 ± 167 50 ± 11 29 ± 4 24 ± 0 24 ± 0 
765 ± 170 884 ± 164 49 ± 10 26 ± 1 24 ± 0 24 ± 0 
10 757 ± 172 917 ± 161 50 ± 10 29 ± 4 24 ± 0 24 ± 0 
25 788 ± 179 945 ± 192 52 ± 11 36 ± 6 24 ± 0 24 ± 0 
50 752 ± 169 818 ± 131 41 ± 6 39 ± 7 24 ± 0 24 ± 0 
24 119 ± 43 259 ± 66 25 ± 0 34 ± 9 37 ± 8 38 ± 6 
80 ± 26 312 ± 56 27 ± 2 25 ± 0 36 ± 7 38 ± 6 
10 129 ± 73 304 ± 62 27 ± 2 34 ± 6 35 ± 6 38 ± 6 
25 143 ± 70 246 ± 80 28 ± 3 35 ± 9 35 ± 6 38 ± 6 
50 113 ± 51 200 ± 46 25 ± 0 34 ± 9 35 ± 6 38 ± 6 

[]  p < 0.05, t-test.

Conclusions: Burn injury diminished peak sarcomere shortening. LPS inhibits sarcomere shortening in a dose-dependent fashion where cytokine levels are increased in cardiomyocytes 1 hour post-burn, this difference is abolished at 6, 12, and 24 hours. Exposure of cardiomyocytes to LPS does not have an effect on cytokine synthesis.

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© 2004  Publié par Elsevier Masson SAS.
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Vol 199 - N° 3S

P. 37 - septembre 2004 Retour au numéro
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