Les neuropathies des petites fibres (NPF) sensitives sont caractérisées par une atteinte prédominante des fibres nerveuse de petit calibre myélinisées (A-delta) ou amyéliniques (C). La NPF constitue le mode d’atteinte neurologique électif des amyloses systémiques génétiques (TTR) ou dysglobulinémiques. La méthode de référence de diagnostic de NPF est la technique de quantification de la densité en fibres nerveuses intra-épidermique (DFNIE) sur biopsie cutanée. Le développement de modèles murins d’amylose requiert la mise au point de méthodes simples et reproductibles d’évaluation de la DFNIE chez la souris.

Nous appliqué la technique de quantification de la DFNIE sur des prélèvements de peau plantaire de patte arrière chez 31 souris C57.Bl6 femelles âgées de 2, 6 et 10 mois (prélèvement d’un coussinet plantaire au punch de 3mm ou prélèvement au scalpel). Les prélèvements cutanés ont été fixés au PFA 4 % pendant 3h puis cryopréservés dans le sucrose 10 % overnight. Le prélèvement a congelé à −80°C en OCT dans l’isopentane. Les fibres nerveuses ont été visualisées par immunomarquage de la protéine panaxonale PGP9.5 par immunofluorescence en FICT sur coupe épaisse (50μm). La quantification de la DFNIE a été réalisée en comptant le nombre d’axone croisant la jonction dermo-épidermique par unité de longueur.

La DFNIE plantaire sur coussinets plantaires était de 64,6±5,3 fibres/mm à 2 mois (n=5), 58,2±10,2 fibres/mm à 6 mois (n=10), et 52,3±11,9 fibres/mm à 10 mois (n=6). La DFNIE tend à diminuer avec l’âge de 2 à 10 mois (p=0,06). Le prélèvement au scalpel (2 mois, n=10) montre une DFNIE hétérogène variant de 7,06 à 83,7 fibres/mm, dépendant de la zone de peau analysée.

Notre technique de quantification de la DFNIE sur biopsie par punch-biopsie cutanée s’avère fiable et parfaitement applicable à l’étude de modèles murins de neuropathie sensitive.