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The influence of bovine casein-derived exorphins on mast cells in rodents - 01/01/02

M.  Stepnik a ,  M.  Kurek b * *Corresponding author

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Résumé

The secretagogue effects of α-casein (90-95) and β-casomorphin-7 on two populations of mast cells in rodents were investigated. Mast cells of “connective tissue type” were obtained from rat peritoneal cavity (PMC), and “mucosal-like type” mast cells (BMMC) were cultured from mouse bone marrow cells. β-Hexosaminidase activity was considered to be a marker of the cells' secretory response. No reaction of BMMC on exorphins was found at up to millimolar concentrations. β-Casomorphin-7 and α-casein (90-95) exert secretagogue effect on PMC at milli- and micromolar concentrations, respectively. For this reason, further experiments were performed with α-casein (90-95) only. The PMC were activated in a non-cytotoxic, dose-, temperature-, and energy-dependent manner. Although PMC were responsive in a calcium and magnesium free buffer, the reaction was abolished when preincubation with EDTA was performed. Preincubation with opiate antagonist, naloxone, was effective only at millimolar concentration range. The significant decrease in PMC reactivity to α-casein (90-95) after preincubation with benzalkonium chloride suggests a peptidergic pathway of activation which involves a membrane-assisted but receptor-independent stimulation of Gi-like proteins.

Résumé

Nous avons étudié l'effet sécrétoire de la α-caséine: 90-95 et de la β-casomorphine-7 sur deux populations différentes des mastocytes de rongeurs. Les mastocytes du type « mésenchymateux » ont été obtenues de la cavité péritonéale des rats (PMC). Les cellules correspondantes aux mastocytes du type « muqueux » ont été obtenus par culture des cellules myéloïdes des souris (BMMC). L'activité de la β-hexo-saminidase a été considéré comme l'indicateur de la réponse sécrétoire. Nous n'avons pas trouvé une réponse sécrétoire des BMMC après stimulation avec les deux exorphines examinées. Par contre, cet effet a été remarquable à l'égard des PMC stimulées par concentrations millimolaires de β-casomorphine-7 et micromolaires de la α-caséine 90-95. Dans les expériments suivants l'effet de α-caséine 90-95 sur PMC a été évalué. L'effet sécrétoire n'était pas liée à un effet toxique et il s'agissait d`une réaction dépendante de la dose appliqué, de la température et d'énergie. Même si la réaction a eu lieu dans un médium prouvé de calcium et magnésium, elle disparaissait après une préincubation avec EDTA. L'effet inhibitoire d'un antagoniste des opiacés a été lié qu'aux concentrations millimolaires de la naloxone. Par contre, l'effet sécrétoire de la α-caséine 90-95 a pu être inhibé par une préincubation avec chlorure de benzalkonium. Ce peptide opiacé agit probablement par activation peptidergique, qui engage l'activation des protéines correspondantes au type Gi. Le processus d'activation est lié aux structures de la membrane cellulaire mais il est indépendant des récepteurs.

Mots clés  : α-Casein: 90-95 ; β-Casomorphin-7 ; Rat peritoneal mast cells ; Mouse bone marrow-derived “mucosal-like” mast cells ; β-Hexosaminidase activity ; Secretory effect of α-casein: 90-95.

Mots clés  : α-Caséine: 90-95 ; β-Casomorphine-7 ; Les mastocytes péritonéaux de rat ; Les cellules myéloïdes des souris correspondantes aux mastocytes du type mucosal ; L'activité de la β-hexosaminidase ; L'effet sécrétoire de la α-caséine: 90-95.

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Vol 42 - N° 5

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