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Herbal pre-conditioning induces proliferation and delays senescence in Wharton’s Jelly Mesenchymal Stem Cells - 08/08/17

Doi : 10.1016/j.biopha.2017.06.107 
Avinash Sanap a, Bhawna Chandravanshi b, Tejas Shah a, Girish Tillu c, Anand Dhanushkodi b, Ramesh Bhonde b, Kalpana Joshi a,
a Department of Biotechnology, Sinhgad College of Engineering, Affiliated to Savitribai Phule Pune University, Pune 411041, India 
b School of Regenerative Medicine, Manipal University, Bangalore 560065, India 
c Interdisciplinary School of Health Sciences, Savitribai Phule Pune University, Pune 411007, India 

Corresponding author at: Department of Biotechnology, Sinhgad College of Engineering, Vadgaon (Bk), Affiliated to Savitribai Phule Pune University, Pune 411041, India.Department of BiotechnologySinhgad College of EngineeringVadgaon (Bk)Affiliated to Savitribai Phule Pune UniversityPune411041India

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Abstract

Background

Mesenchymal Stem Cells (MSCs) are multipotent stem cells which are being explored for various clinical applications. Isolation and in-vitro expansion of MSCs remain important in achieving desired cell number for the therapy. However, in-vitro proliferation of MSCs is often associated with senescence and early onset of apoptosis which limits its therapeutic ability and long term clinical use. Tinospora cordifolia and Withania somnifera are used widely in Ayurveda: the traditional Indian system of medicine and are reported to have rejuvenating and anti-aging potential. In the present study, we investigated the effect of Tinospora cordifolia and Withania somnifera on proliferation and senescence of wharton’s jelly MSCs (WJMSCs) in-vitro.

Methods

WJMSCs were treated in culture medium with Tinospora cordifolia leaf and Withania somnifera root extracts to examine their effect on proliferation and senescence properties of WJMSCs. Proliferation of WJMSCs was assayed by cell count, MTT, BrdU incorporation assay, cell cycle analysis and Ki67 mRNA expression. Senescence was demonstrated using β-galactosidase senescence assay and associated mRNA markers.

Results

Culture medium supplemented with Tinospora cordifolia leaf and Withania somnifera root extracts exhibited significant increase in proliferation of WJMSCs as evidenced by cell count and MTT assay. Cell cycle analysis using propidium iodide showed increase in G2/M phase and decrease in apoptotic cells. BrdU incorporation and upregulation of proliferation marker ki67 by RT PCR showed increased DNA synthesis/proliferation in Tinospora cordifolia and Withania somnifera extract treated MSCs. Delayed senescence was confirmed by β-galactosidase senescence assay and down regulation of senescence marker p21.

Conclusion

Our results demonstrate for the first time that Tinospora cordifolia and Withania somnifera extracts support proliferation and inhibit senescence in WJMSCs making them suitable candidates as supplements for in-vitro expansion without affecting the cell viability indicating its non-toxic nature.

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Keywords : MSCs, Tinospora cordifolia, Withania somnifera, Proliferation, Senescence


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Vol 93

P. 772-778 - septembre 2017 Retour au numéro
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