Dysfonction endothéliale induite par les acides aristolochiques - 21/08/18
, S. Pochet 1, J. Nortier 2, N. Labranche 1, C. Husson 2, E. De Prez 2, G. Berkenboom 2, M.-H. Antoine 2Résumé |
Objectif |
L’atteinte tubulo-interstitielle chronique de la néphropathie induite par les acides aristolochiques (AA) est caractérisée par une atrophie tubulaire et une fibrose interstitielle, mais aussi par une raréfaction significative des capillaires péri-tubulaires [2, 1]. Le but de notre étude était d’évaluer les mécanismes impliqués dans la toxicité endothéliale et la dysfonction vasculaire induites par les AA I et II (mélange 50/50) sur les cellules endothéliales de la veine ombilicale humaine (HUVEC), les cellules endothéliales immortalisées Eahy926 et sur les anneaux aortiques de rat.
Méthode |
La viabilité des cellules HUVEC a été mesurée par le test MTT. Le nombre de noyaux a été compté par le DAPI. L’expression de la molécule d’adhésion cellulaire PECAM (CD31) a été analysée par immunofluorescence. Le test de l’activité superoxyde dismutase (SOD) intracellulaire a été réalisé sur les cellules Eahy926 par une méthode enzymatique (Kit Cayman Chemical Company). Nous avons étudié les relaxations endothélium-dépendantes à l’acétylcholine (ACh) sur les anneaux d’aorte de rat incubés pendant 1h avec 200μM des AA, en présence ou en absence de SOD et de N-acétylcystéine (NAC).
Résultats |
L’exposition aux AA entraîne une diminution significative du nombre total de cellules CD31+ (nombre total de cellules ( %) vs. contrôle (100 %) : 60,27±13,50 avec AA 50 μM et 53,70±8,82 avec AA 100μM, respectivement). Le test MTT montre une toxicité dose-dépendante des AA (viabilité cellulaire ( %) vs. contrôle (100 %) : 70,26±4,80 avec AA 50μM et 12,50±3,26 avec AA 100μM, respectivement). L’activité de la SOD intracellulaire est augmentée en présence des AA et rétablie par la NAC. Les relaxations induites par l’ACh sont significativement diminuées dans les anneaux d’aorte de rat pré-incubés avec 200μM d’AA : l’aire sous la courbe était de 170,9±8,9 dans les contrôles vs 236,0±8,7 en présence des AA (p<0,0001). La NAC (2,5mM) n’a pas protégé les anneaux aortiques de l’altération des relaxations induite par les AA.
Conclusion |
Nos résultats montrent 1) une toxicité dose-dépendante des AA sur les HUVEC ; 2) une augmentation de l’activité de la SOD intracellulaire qui peut être antagonisée en présence de NAC ; 3) une diminution par les AA de la relaxation des anneaux d’aorte induite par l’ACh, diminution atténuée par la SOD mais pas par la NAC, suggérant que l’anion superoxide est responsable de la dysfonction endothéliale induite par les AA.
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Vol 30 - N° 3
P. 181 - septembre 2018 Retour au numéro
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