Modulation de l’expression des protéines de jonctions serrées par la sphingomyéline, un lipide polaire naturellement présent dans les produits laitiers, via l’interleurkine-8 - 15/11/18
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Résumé |
Introduction et but de l’étude |
Les régimes occidentaux sont impliqués dans le développement des maladies métaboliques, dont la composante inflammatoire peut être due à une altération de la barrière intestinale. Les produits laitiers contiennent naturellement la matière grasse sous forme de globule gras, constitués (i) d’un cœur de triglycérides (98 % des lipides) et (ii) d’une membrane biologique riche en lipides mineurs bioactifs, les lipides polaires (2 % des lipides) incluant de manière spécifique la sphingomyéline (SM,∼25 % des lipides polaires). Les composés alimentaires peuvent affecter la barrière intestinale en influençant l’organisation des protéines des jonctions serrées qui sont impliquées dans les transports paracellulaires entre la lumière intestinale et la circulation. Notre hypothèse est que la matière grasse laitière exerce certains de ses effets bénéfiques par l’intermédiaire de la SM, notamment sur l’intégrité de la barrière intestinale qui pourraient réduire une inflammation. Nous avons testé in vitro l’hypothèse que l’interleurkine-8 (IL-8), impliquée dans la maturation de l’épithélium intestinal [1 ], serait un acteur des modifications intestinales en réponse aux lipides polaires laitiers.
Matériel et méthodes |
Des cellules Caco-2/TC7 cultivées sur filtre Transwell® (modèle d’épithélium intestinal) ont été incubées avec des micelles mixtes lipidiques enrichies ou non en SM laitière (0mM, 0,2mM et 0,4mM). L’expression génique des protéines impliquées dans les jonctions serrées (Occludine, claudine et JAM-1, des protéines transmembranaires, et ZO-1, protéine intracellulaire) et la concentration d’IL-8 (au pôle apical et basolatéral) ont été étudiés ainsi que plusieurs marqueurs inflammatoires. Nous avons dans un deuxième temps incubé les cellules avec l’IL-8 recombinante humaine en apical et/ou en basolatéral afin d’observer l’impact sur l’expression génique des protéines de jonctions serrées.
Résultats et analyse statistique |
Après 24h d’incubation avec des micelles enrichies avec 0,4mM de SM, nous avons observé une surexpression de l’occludine (p<0,05), JAM-1 (p<0,05) et de ZO-1 (p<0,01) en comparaison à des micelles dépourvues de SM. Une augmentation de l’expression génique de la claudine-1 est également observée en présence de 0,2mM de SM (p<0,05) et 0,4mM de SM (p<0,05). Nous avons observé en présence de SM, une augmentation de la concentration d’IL-8 en apicale (p<0,01 avec 0,4mM) et en basolatérale (p<0,05 avec 0,2mM ; p<0,01 avec 0,4mM). Nous n’avons pas observé de sécrétion d’IL-6, TNF-α, d’IL-17 et d’IL-22. Tout comme aucune différence au niveau génique n’est observée pour IL-1β et MCP-1. L’incubation d’IL-8 recombinante humaine a induit une augmentation de l’expression génique des protéines de jonctions serrées (Occludine, JAM-1 et ZO-1, p<0,01).
Conclusion |
Nos résultats révèlent un impact de la SM laitière sur la modulation de l’expression des protéines des jonctions serrées et de l’IL-8, ainsi que de sa concentration. Après incubation avec l’IL-8 recombinante, nous avons démontré que les modifications induites par la SM sur les jonctions serrées peuvent être expliquées au moins en partie par l’action de l’IL-8.
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Vol 32 - N° 4
P. 321-322 - novembre 2018 Retour au numéroBienvenue sur EM-consulte, la référence des professionnels de santé.
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