L’autophagie est un système de dégradation et de recyclage du matériel cytoplasmique indispensable à l’homéostasie cellulaire qui peut être déclenchée par différents stimulis dont le stress mécanique. Elle est impliquée dans de nombreuses pathologies rénales lorsqu’elle est déficiente. Son mécanisme dans l’appareil juxta-glomérulaire est peu exploré. L’objectif est de démontrer qu’elle peut être déclenchée in vitro dans les cellules de la macula densa sous l’effet d’un stress mécanique.

Le système Ibidi Pump est un système de connexion d’une pompe à des microslides spécifiques qui est capable de mimer un flux tubulaire. A partir de cellules macula densa-like (MMDD) soumises à un flux unilatéral généré par ce système, nous caractérisons la spécificité de cette lignée cellulaire en condition statique et sous stress mécanique par RT qPCR des marqueurs COX2, nNOS et NKKC2. Nous évaluons l’induction de la machinerie autophagique sous stress mécanique en mesurant LC3, protéine clé de la machinerie autophagique, par immunofluorescence et western blot.

Les cellules MMDD expriment en RT-qPCR les marqueurs cyclo-oxygénase 2, NO-synthase et NKCC2 spécifiques de la macula densa. Leur expression s’amplifie sous l’effet du stress mécanique généré par la pompe Ibidi. Le stress mécanique induit une réponse autophagique dans les cellules de la macula densa dès 0.96dyn/cm², à 2h et à 48h de manière significative avec augmentation de LC3 I et II en western blot, confirmé en immunofluorescence.

La lignée MMDD exprime les marqueurs spécifiques de la macula densa avec un phénotype qui s’amplifie sous l’effet du stress mécanique. Il y a induction de la machinerie autophagique sous l’effet du stress mécanique dans les cellules de la macula densa.