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Cross-reactivity of nefopam and its metabolites on three different urine benzodiazepines immunoassay screenings: A comparative study - 01/06/20

Doi : 10.1016/j.toxac.2020.05.002 
Anaëlle Chavant a, Théo Willeman a, b, , Julia Tonini a, Xavier Fonrose a, Jean Christophe Boyer c, Sabine Cohen d, Jérôme Guitton d, Françoise Stanke-Labesque a
a Laboratoire de pharmacologie, pharmacogénétique et toxicologie, CHU de Grenoble-Alpes, CS 10217, 38043 Grenoble cedex 9, France 
b Clinique de médecine légale, CHU de Grenoble Alpes, France 
c Laboratoire de pharmacologie, CHU de Nîmes, France 
d Laboratoire de biochimie-toxicologie, centre hospitalier Lyon-Sud, hospices civils de Lyon, Pierre-Bénite, France 

Corresponding author at: Laboratoire de pharmacologie, pharmacogénétique et toxicologie, CHU de Grenoble-Alpes, CS 10217, 38043 Grenoble cedex 9, France.Laboratoire de pharmacologie, pharmacogénétique et toxicologie, CHU de Grenoble-AlpesCS 10217Grenoble cedex 938043France
Sous presse. Épreuves corrigées par l'auteur. Disponible en ligne depuis le Monday 01 June 2020

Summary

Objectives

To highlight an analytical interference involving nefopam and its metabolites on urinary benzodiazepine screening with Enzyme Multiplied Immunoassay Technique (EMIT) Atellica CH from Siemens Healthineers, and to evaluate two other immunoassays: MULTIGENT on Architect from Abbott Diagnostics and Cloned Enzyme Donor Immunoassay (CEDIA) Thermo Fisher kits on Cobas from Roche Diagnostics.

Case/methods

An analytical interference was suspected for a 58-year-old-woman hospitalized for unexplained malaise. The urinary EMIT Atellica benzodiazepine immunoassay was positive. Screenings by liquid chromatography coupled with diode array detector (LC-DAD) and liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) identified nefopam and metabolites but no benzodiazepine. Drug-free urine has been spiked at different concentrations of nefopam (187,5–3000μg/L) and tested on EMIT Atellica assay. Three urines from nefopam-treated patients and two negative controls have been selected to assess this cross-reactivity. Nefopam quantification has been performed by LC-DAD. Different immunoassays were evaluated: EMIT on Atellica, MULTIGENT on Architect and CEDIA on Cobas.

Results

Drug-free urines spiked with nefopam were negative on EMIT Atellica immunoassay. The interference observed was confirmed for nefopam-treated patients (2/3) on EMIT Architect. For one patient, an interference was observed with a low concentration of nefopam (< 5μg/L) but associated with the presence of two metabolites. All CEDIA immunoassay results were negative. This interference is not mentioned in supplier records.

Discussion/conclusion

Comparison of three immunoassay techniques revealed a heterogeneity of the interference. Nefopam metabolites may be responsible for this cross-reactivity, suggesting the importance of testing them during the kits evaluation phase. This study highlights the need to confirm immunoassay results by more specific techniques.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Keywords : Immunoassay, Interference, Nefopam, Benzodiazepine, EMIT, CEDIA


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