The purpose of the present study was to clarify the expression of ARID1A in polycystic ovary syndrome (PCOS) and its effect on ovarian granulosa cells (GCs).

Serum samples were collected from PCOS patients to detect the expression of ARID1A by qRT-PCR. Then, mouse and human ovarian GCs were isolated and divided into several groups according to difference in transfection, and the following experiments were performed: MTT assay, flow cytometry, qRT-PCR, radioimmunoassay, and Western blotting.

ARID1A was down-regulated in the serum of PCOS patients and ovarian GCs from PCOS mice. Human and mouse ovarian GCs in the ARID1A group and in cells that were exposed to LY294002, a PI3/Akt pathway inhibitor, showed decreased proliferation and increased apoptosis compared to those in the mock group, and a higher percentage of G0/G1 phase with a lower percentage of S phase or G2/M. Moreover, the expression of steroid metabolism-related genes (3βHSD, Cyp11a1, StAR and Cyp19a1) in both human and mice PCOS GCs was down-regulatedresulting in lower estradiol (E2) and progesterone (P) 48h accumulation. In addition, protein expression of cleaved caspase-3, a main executor of apoptosis, was increased while expression of p-Akt/Akt and cyclin D1 was decreased in GCs from human and mice PCOS. However, the levels of the above indicators in the si-ARID1A group showed inverse changes. Furthermore, LY29400 treatment could reverse the effect of si-ARID1A on the ovarian GCs.

ARID1A was down-regulated in GCs cells form PCOS women and from PCOS animal models, while ARID1A overexpression can suppress the PI3K/Akt pathway to inhibit proliferation and promote apoptosis in ovarian granulosa cells.

Le but de cette étude était d’évaluer l’expression de la protéine ARID1A et son effet sur les cellules ovariennes de la granulosa (CG) chez des patientes atteintes du syndrome des ovaires polykystiques (SOPK) ou des souris dont le SOPK a été induit.

Des échantillons de sérum ont été prélevés chez les patientes SOPK afin de détecter l’expression de ARID1A par qRt-PCR. Ensuite, les CGs d'origines humaine ou murines ont été isolées puis divisées en plusieurs groupes selon les différentes transfections effectuées. Ces cellules ont été soumises à différents tests, dont le test MTT, la cytométrie en flux, la qRT-PCR, le dosage radio-immunologique et le Western Blot.

Chez les patientes SOPK et les GC ovariennes issues des souris SOPK, ARID1A était régulée de façon négative dans le sérum. Les GCs humaines et murines des groupes ARID1A et/ou exposés au LY294002, un inhibiteur de la voie PI3K/Akt, présentaient une prolifération cellulaire diminuée mais, une augmentation de l’apoptose par rapport aux GCs du groupe témoin. Dans ces groupes, les cellules présentaient toutes un pourcentage plus important de phases G0/G1 et une diminution du nombre de phases S ou G2/M. Par ailleurs, l’expression de gênes impliqués dans la synthèse des hormones stéroïdes (3βHSD, Cyp11a1, StAR et Cyp19a1) était également régulée négativement avec une accumulation de 48h diminuée d’estradiol (E2) et de progestérone (P) par les cellules GCs SOPK. De plus, l’expression protéique des caspase-3 clivée, un inducteur d'apoptose, était augmentée tandis que l’expression d’Akt/protéine kinase B et de la Cycline D1 était diminuée. Cependant, dans le groupe si-ARID1A, dont le gène ARID1A était réprimé, tous les indicateurs cités précédemment montraient des variations inverses. En outre, les résultats montrent que LY294002, un inhibiteur de la voie PI3K/Akt, peut inverser l’effet de si-ARID1A sur les GC ovariennes.

La protéine ARID1A est régulée négativement dans les SOPK tandis que la surexpression d’ARID1A en inhibant la voie PI3K/Akt, diminue la prolifération et favorise l’apoptose des cellules de la granulosa ovarienne.