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Étude de l’item d’interférence dans un dossier de validation de méthode : cas de la coloration HPS après fixation en formol-zinc et comparaison à la fixation en formol tamponné à 4 % - 13/06/21

Analysis of interference criteria for the validation of a method file: HPS staining after fixation with zinc-formalin in comparison to fixation with the classical 4% buffered formalin solution

Doi : 10.1016/j.annpat.2020.10.003 
Arnault Tauziède-Espariat a, , Dominique Côme a, Joëlle Massé a, Myriam Zaomi a, Aurélien Collard a, Joëlle Lacombe a, Michelle Oliveiro a, Leïla Mehdi a, Noémie Pucelle a, Priscille Gigant a, Charlotte Berthaud a, Valérie Thuries a, Alexandre Roux b, Dominique Cazals-Hatem c, Albane Gareton a, Mélanie Pagès a, Fabrice Chrétien a, Pascale Varlet a, Emmanuèle Lechapt-Zalcman a
a Service de neuropathologie, GHU de Paris-psychiatrie et neurosciences, centre hospitalier Sainte-Anne, 1, rue Cabanis, 75014 Paris, France 
b Service de neurochirurgie, GHU de Paris-psychiatrie et neurosciences, centre hospitalier Sainte-Anne, 75014 Paris, France 
c Service de pathologie, hôpital Beaujon, AP–HP, 92110 Clichy, France 

Auteur correspondant.

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Résumé

Introduction

Le service de neuropathologie de l’hôpital Sainte-Anne fixe les prélèvements dans du formol-zinc, cependant, aucune publication référencée sur Pubmed n’a validé l’utilisation de ce fixateur. Dans le cadre de l’accréditation de la coloration standard (HPS pour Hémalun-Phloxine-Safran), nous avons initié la constitution d’un dossier de validation de méthode où ce fixateur représente une substance « interférente » pouvant modifier la qualité de cette technique. L’objectif de ce travail est de prouver que la fixation en formol-zinc est aussi pertinente que la fixation en formol tamponné à 4 %.

Matériels et méthodes

Une cohorte prospective de fragments fixés en « miroir » en formol-zinc et en formol tamponné à 4 % a été constituée à partir de prélèvements frais. L’inclusion, la coupe et la coloration HPS étaient réalisées à l’identique entre les deux séries de fixateurs. Selon les recommandations de l’Assurance française en assurance qualité (AFAQAP), quatre critères (qualité générale de la coloration, composants de la matrice extracellulaire, détails cytoplasmiques et nucléaires) ont été évalués, selon un score de 0 à 3, par trois pathologistes (dont un pathologiste extérieur au service) en « aveugle » du fixateur.

Résultats

La cohorte comprenait 43 prélèvements. Pour trois des quatre critères étudiés, les prélèvements fixés en formol-zinc avaient un score supérieur, et ce, de façon significative, aux prélèvements fixés en formol classique.

Discussion et conclusions

Nos résultats montrent que le formol-zinc ne constitue pas une substance interférente pour la qualité de la coloration HPS pour les prélèvements de neuropathologie.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Summary

Introduction

The department of neuropathology of Sainte-Anne Hospital uses zinc-formalin as the fixative agent for its samples. No publication referenced in Pubmed has proven the validity of this fixative agent. In the context of the accreditation of our standard staining (HPS for Hemalun-Phloxin-Saffron), we started a file for the validation of this method in which the fixative agent constitutes an « interfering » substance which can modify the quality of the technique. The aim of this study was to prove that the use of zinc-formalin as a fixative agent is as suitable as the fixation with 4 % buffered formalin.

Materials and methods

A cohort of samples fixed by zinc-formalin and by 4 % buffered formalin was performed on fresh samples, then cut and stained by HPS. The slides were interpreted by three pathologists (one of them was outside our centre)  ``blind '' to the fixative agent and they evaluated four criteria (general quality of the staining, components of the extracellular matrix, cytoplasmic details, and nuclear details) and scored them (from 0 to 3) according to the Association française en assurance qualité (AFAQAP) recommendations.

Results

The cohort included 43 samples. The results of the analysis showed that for samples fixed by zinc-formalin, three of the four criteria obtained significantly a better score than the samples fixed by classical formalin.

Discussion and conclusions

Our results show that the zinc-formalin fixative does not constitute an  ``interfering '' agent for the quality of the HPS staining for neuropathological samples.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Mots clés : Hémalun-Phloxine-Safran, Validation de méthode, Formol-zinc

Keywords : Hemalun-Phloxin-Saffron, Validation method, Zinc-formalin


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Vol 41 - N° 3

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