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Apport de l’électrophorèse capillaire de zone dans l’exploration étiologique des acidoses métaboliques - 29/08/21

Interest of capillary zone electrophoresis to explore the origin of metabolic acidosis

Doi : 10.1016/j.toxac.2021.08.001 
Pascal Houzé a, b, , Laurence Labat a, c
a Laboratoire de Toxicologie Biologique, Fédération de Toxicologie, Hôpital Lariboisière (Assistance Publique- Hôpitaux de Paris), 2, rue Ambroise Paré, 75010 Paris, France 
b Unité de Technologies Chimiques et Biologiques pour la Santé (UTCBS), CNRS UMR8258 - U1022, Faculté de Pharmacie Paris Descartes, Université Paris, 4, avenue de l’Observatoire, 75006 Paris, France 
c Inserm UMRS-1144, Université de Paris, 4, avenue de l’Observatoire, 75006 Paris, France 

Auteur correspondant.
Sous presse. Épreuves corrigées par l'auteur. Disponible en ligne depuis le Sunday 29 August 2021
Cet article a été publié dans un numéro de la revue, cliquez ici pour y accéder

Résumé

Une valeur de pH plasmatique inférieure à 7,35 caractérise une acidose respiratoire, métabolique ou mixte. L’exploration des acidoses métaboliques est souvent limitée à la mesure des lactates plasmatiques sans identification ni quantification d’autres acides organiques dont la détection permettrait de préciser l’étiologie des acidoses métaboliques qui peuvent être d’origine génétiques, pathologiques ou toxicologiques. Les méthodes analytiques classiques comme la chromatographie gazeuse ou liquide sont souvent mal adaptées à la séparation des acides organiques qui sont des composés de faible poids moléculaire, hydrosolubles et chargées. Nous avons développé une méthode par électrophorèse capillaire de zone permettant de séparer en moins de 8minutes 14 acides organiques et 4 anions minéraux. Notre méthode permet la quantification des neufs principaux acides organiques retrouvés dans des grandes pathologies (diabète, insuffisance rénale) ou lors de la consommation de médicaments, de drogues ou de toxiques. Notre méthode est linéaire dans le plasma entre 10 et 2 000mg/L, et dans l’urine entre 25 et 3 000mg/L pour chacun des 9 acides. Les limites de quantification sont de 10mg/L et 25mg/L pour le plasma et les urines, respectivement. Pour la répétabilité et la fidélité intermédiaire, les coefficients de variation sont inférieurs à 15 % et les valeurs de biais sont comprises entre ±10 %. Pour les 2 matrices, les pourcentages de récupération sont compris entre 80,4 % et 110 %. La spécificité de notre méthode est assurée par la reproductibilité des temps de migration. Nous n’avons pas mis en évidence d’interférence, en particulier avec les anticoagulants comme le citrate, l’EDTA et l’héparine. À travers 15 exemples, nous montrons que cette approche par électrophorèse capillaire permet de préciser l’étiologie d’une acidose, quantifier les acides organiques impliqués dans différents domaines d’application allant de la clinique au médico-légal, en passant par l’expérimentation animale.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Summary

A plasma pH value below 7.35 characterizes a respiratory, metabolic or mixed acidosis. The exploration of metabolic acidosis is often limited to the measurement of plasma lactates without identification or quantification of other organic acids whose detection would allow to specify the etiology of metabolic acidosis which can be of genetic, pathological or toxicological origin. Classical analytical methods such as gas or liquid chromatography are often poorly adapted to the separation of organic acids which are low molecular weight, water soluble and charged compounds. We have developed a capillary zone electrophoresis method allowing the separation of 14 organic acids and 4 mineral anions in less than 8minutes. Our method is linear in plasma between 10 and 2000mg/L, and in urine between 25 and 3000mg/L for each of the 9 acids. The limits of quantitation are 10mg/L and 25mg/L for plasma and urine, respectively. For repeatability and intermediate precision, coefficients of variation are less than 15 % and bias values are within ±10%. For the 2 matrices, the recovery percentages are between 80.4% and 110%. The specificity of our method is ensured by the reproducibility of migration times. We did not find any interference, in particular with anticoagulants such as citrate, EDTA and heparin. Through 15 examples, we show that this approach by capillary electrophoresis allows to specify the etiology of an acidosis, to quantify the organic acidoses implied in various fields of application going from the clinic to the forensic, while passing by the animal experimentation.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Mots clés : Acides organiques, Électrophorèse capillaire, Acidose métabolique, Toxicologie

Keywords : Organic acids, Capillary electrophoresis, Metabolic acidosis, Toxicology


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