Modification d’hybridomes par la technologie CRISPR pour la génération de nouveaux anticorps anti-érythrocytaires - 24/11/21
Résumé |
L’utilisation des anticorps monoclonaux a révolutionné la fabrication de réactifs d’hématologie. Des anticorps sont disponibles pour la plupart des antigènes sanguins, cependant l’isotype de la chaîne lourde des immunoglobulines restreint leur application en tant que réactif. Pour lever cette limitation et valoriser un patrimoine existant, la modification d’hybridomes établis sécréteurs d’IgG humaines a été réalisée à l’aide des outils CRISPR Cas9 pour l’obtention d’anticorps de type IgM.
Trois hétéro-hybridomes humains sécréteur d’anticorps anti-FY1, -KEL1 et MNS3 ont été co-transfectés avec un complexe gRNA-Cas9 et un ADN donneur double brin contenant le gène codant pour la chaîne mu des immunoglobulines. Après sélection des clones modifiés par clonage, les surnageants de culture ont été analysés par cytométrie afin d’isoler les clones ayant intégrés la cassette d’intérêt. La stabilité des clones obtenus, ainsi que leurs utilisations pour la fabrication de réactifs d’immuno-hématologie est actuellement en cours. Cependant, l’utilisation d’outils CRISPR pour la modification d’hybridome, en particulier le « rétro-switch », a été validé dans cette étude. D’autres modifications permettant d’améliorer des clones existants sont à l’étude et devrait permettre d’enrichir la source de matières premières disponible pour les industriels du domaine du diagnostic.
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Vol 28 - N° 4S
P. S110 - novembre 2021 Retour au numéroBienvenue sur EM-consulte, la référence des professionnels de santé.
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