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Influence de la densité de peptides RGD greffés en surface de polyéthylène téréphtalate sur l’attachement des MC3T3 - 21/04/08

Doi : 10.1016/j.rbmret.2007.12.003 
C. Chollet a, , C. Labrugère b, M.-C. Durrieu a
a Inserm U577, université Victor-Segalen, Bordeaux-2, 146, rue Léo-Saignat, 33076 Bordeaux cedex, France 
b ICMCB-CNRS, avenue du docteur-Schweitzer, 33608 Pessac, France 

Auteur correspondant.

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Résumé

Le but de cette étude a été d’évaluer l’influence de différentes densités de peptides RGD greffés en surface de polyéthylène téréphtalate sur l’adhésion de cellules ostéoblastiques MC3T3. La modification biomimétique a été réalisée selon un procédé en trois étapes : création de fonctions COOH en surface du PET, greffage d’un agent de couplage et enfin immobilisation des peptides RGD. L’originalité de ce travail se trouve non seulement dans l’évaluation de la densité de peptides immobilisés en surface du matériau mais également dans l’étude du comportement cellulaire vis-à-vis de ces surfaces à densité contrôlée. Après chaque étape de fonctionnalisation les modifications ont été validées par différentes techniques physicochimiques : la spectroscopie de photoélectrons X a permis de valider le greffage et l’imagerie bêta haute résolution couplée à l’utilisation d’acides aminés radiomarqués a été utilisée dans le but d’évaluer la densité de peptides. Nous avons également pu, grâce à cette dernière technique, prouver la stabilité de cette liaison peptides–matériaux. L’étude du comportement cellulaire a été réalisée par immunomarquage des protéines impliquées dans la formation des contacts focaux.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Abstract

The aim of this study was to evaluate the impact of different densities on MC3T3 cells attachment onto polyethylene terephthalate (PET) film surfaces. Biomimetic modifications were performed by means of a three-step reaction procedure: creation of COOH functions onto PET surface, coupling agent grafting and finally immobilization of peptides. The originality of this work consist, in one hand on quantifying RGD peptides densities grafted onto PET, and on the other hand on studying MC3T3 cells responses after seeding on such biomimetic surfaces. After each functionnalization step, modifications were validated by several physicochemical techniques: X-Ray Photoelectron Spectroscopy permitted to prove the grafting and high-resolution β-imager coupled with use of radiolabelled amino acids served in evaluation of peptides densities. Moreover, this last technique permit us to ensure stability of binding between peptides and polymer. The efficiency of this new route for biomimetic modification of PET surface was demonstrated by measuring the adhesion at 15 hours of osteoblast like cells. Study of cellular comportment was realized by means of focal contact proteins (vinculin, actin) immunostaining.

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Mots clés : Biomatériau, Greffage, Peptides RGD, Polyéthylène téréphtalate

Keywords : Biomaterials, Grafting, RGD peptides, Polyethylene terephthalate


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Vol 29 - N° 1

P. 7-12 - mars 2008 Retour au numéro

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