Le GM-CSF (Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor) est un facteur de croissance granulocytaire essentiel pour l’homéostasie pulmonaire et un médiateur de l’inflammation tissulaire. Des stratégies de blocage du GM-CSF sont développées pour le traitement de pathologies inflammatoires chroniques. Leurs effets sur les macrophages pulmonaires (MP) sont encore mal connus. Nous avons sélectionné deux traitements: un anticorps monoclonal anti GM-CSF (anti GM-CSF mAb) et le ruxolitinib (inhibiteur de Janus Kinase 1/2), ciblant la voie du GM-CSF respectivement en amont et en aval de la fixation à son récepteur. Nous avons étudié leurs effets sur les MPs humains, en termes de sécrétion de cytokines et de capacité de phagocytose.

Le tissu pulmonaire est issu de pièces d’exérèse chirurgicales. Les MPs ont été isolés par adhérence au support de culture. Le GM-CSF a été dosé en ELISA dans le surnageant des explants de parenchyme et des MPs, avec ou sans stimulation par LPS. Les MPs ont été traités pendant 24h par du ruxolitinib (0,1 à 10μM) ou un anti GM-CSF mAb (0,05 à 1μg/ml), avant d’ajouter du LPS (10ng/ml) ou du POLY(I:C) (10μg/ml). Les cytokines ont été dosées dans le surnageant par ELISA. La phagocytose a été évaluée par cytométrie en flux sur des MP en présence de bioparticules d’E.Coli marquées.

La production de GM-CSF par le parenchyme pulmonaire était augmentée en réponse au LPS. Les MPs étaient capables de produire du GM-CSF en réponse au LPS. Le ruxolitinib et les mAb ne modifiaient pas la production basale des cytokines par les MPs. Le Ruxolitinib inhibait de façon concentration-dépendante la production LPS et POLY(I:C)-induite de TNF-α, IL1β, IL6, IL10, IL23, CCL2 et CXCL10. Les mAb diminuaient la production LPS et POLY(I:C)-induite de IL6, IL10 et CCL2 mais seulement à la plus forte concentration et ne modifiaient pas celle de TNF-α ni de CXCL10, IL1β, IL23. L’activité phagocytaire des MPs n’était pas modulée par le ruxolitinib ni les mAb.

Le ruxolitinib exerce une action anti-inflammatoire puissante sur les MPs humains sans modifier leur capacité de phagocytose. Celle-ci est reproduite seulement en partie par les anticorps anti GM-CSF, suggérant notamment l’implication d’autres voies de régulation dans l’effet du ruxolitinib sur les MPs.