The aim of the study was to develop a simple, sensitive and cost-efficient bioanalytical method for the simultaneous determination of niclosamide and bicalutamide in rat plasma with appropriate validation.

Real-time estimation was carried out using Ultra Flow Liquid Chromatography. The solvent system consisting of 20mM sodium acetate buffer at pH 4.0 and acetonitrile (65: 35% v/v) is used as the mobile phase. The analytes were extracted by protein precipitation with acetonitrile and separated on an Eclipse plus C18 Column (25cm×5cm×4.6μm) with L1 packing in isocratic mode with a flow rate of 1ml/min at 254nm. The developed method was validated on the basis of the bioanalytical guidelines of the US American FDA.

The retention times of niclosamide and bicalutamide were 4.19min and 8.61min, respectively, with a running time of 15minutes. The calibration ranges are 50–600ng/ml for niclosamide and 100–1200ng/ml for bicalutamide. Regression equations for niclosamide and bicalutamide were y=55746x - 1E+06 and y=22051x−576888 with regression coefficient (R2) 0.9952 & 0.9982 using the unweighted and weighted linear regression with a weighting factor of 1/xo, 1/x, 1/√x, and 1/x2. The accuracy of niclosamide and bicalutamide were 46.01ng/ml to 584.10ng/ml and 82.30ng/ml to 1149.13ng/ml, respectively. The percentage recoveries for niclosamide and bicalutamide were 86.51–90.29% & 88.64–93.99%, respectively.

The result of the present study show that the method developed is a simple, fast and precise method and is used in bioavailability and bioequivalence studies as well as during routine therapeutic drug monitoring of niclosamide and bicalutamide.

Le but de l’étude était de développer une méthode bioanalytique simple, sensible et rentable pour la détermination simultanée du niclosamide et du bicalutamide dans le plasma de rat avec une validation appropriée.

L’estimation en temps réel a été réalisée en utilisant la chromatographie liquide Ultra Flow. Le système de solvants composé d’un tampon d’acétate de sodium 20mM à pH 4,0 et d’acétonitrile (65 : 35 % v / v) est utilisé comme phase mobile. Les analytes ont été extraits par précipitation des protéines avec de l’acétonitrile et séparés sur une colonne C18 Eclipse plus (25cm×5cm×4,6μm) avec garnissage L1 en mode isocratique avec un débit de 1mL / min à 254nm. La méthode développée a été validée sur la base des directives bioanalytiques de la FDA américaine.

Les temps de rétention du niclosamide et du bicalutamide étaient de 4,19min et 8,61min, respectivement, avec un temps de fonctionnement de 15min. Les gammes d’étalonnage sont de 50 à 600ng/mL pour le niclosamide et de 100 à 1200ng/mL pour le bicalutamide. Les équations de régression pour le niclosamide et le bicalutamide étaient y=55746x - 1E+06 et y=22051x−576888 avec un coefficient de régression (R2) de 0,9952 & 0,9982 en utilisant la régression linéaire non pondérée et pondérée avec un facteur de pondération de 1/xo, 1/x, 1/√x, et 1/x2. La précision du niclosamide et du bicalutamide était de 46,01ng / mL à 584,10ng / mL et de 82,30ng / mL à 1149,13ng / mL, respectivement. Les pourcentages de récupération pour le niclosamide et le bicalutamide étaient de 86,51–90,29 % et 88,64–93,99 %, respectivement.

Les résultats de la présente étude montrent que la méthode développée est une méthode simple, rapide et précise et qu’elle est utilisée dans les études de biodisponibilité et de bioéquivalence ainsi que dans le cadre du suivi thérapeutique de routine du niclosamide et du bicalutamide.