Injection of exogenous RNA in amphibian oocytes leads to RNA level fluctuations which are sensitive to cordycepin, an RNA chain elongation terminator - 01/01/03

Doi : 10.1016/j.crvi.2003.10.002

Nicole Montreau ^a , Sabine Vaur ^a , François Dautry ^b , Yannick Andéol ^a ^* *Corresponding author.

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Résumé

Using an in vivo heterologous system to study the stability of Xenopus laevis RNA injected into axolotl (Ambystoma mexicanum) fertilized eggs, we have previously observed unexpected fluctuations in RNA level during early development [Andéol et al., Differentiation 63 (1998) 69-79]. In this study, we further characterize this phenomenon and establish its existence during axolotl and Xenopus oogenesis, suggesting a phylogenetically conserved mechanism. The phenomenon can occur with a variety of exogenous sense and antisense substrates. RNase protection experiments establish that most of the molecules have the same polarity as the initially injected RNA. In addition, trace amount of complementary RNA (cRNA) can be detected the injected samples. Cordycepin prevent increases in RNA levels indicating the involvement of an RNA synthesis. These results indicate the existence of an in vivo post-transcriptional RNA amplification mechanism during the early development of amphibians. To cite this article: N. Montreau et al., C. R. Biologies 326 (2003).

Résumé

Nous avons mis au point un système hétérologue permettant d'étudier in vivo la stabilité d'ARN de Xenopus laevis micro-injectés dans des oeufs fécondés d'axolotl (Ambystoma mexicanum). De façon inattendue, nous avons observé une augmentation du niveau d'ARN injecté pendant les premières divisions de l'oeuf [Andéol et al., Differentiation 63 (1998) 69-79]. Dans cette étude, nous caractérisons ce phénomène associé à des fluctuations dans le niveau d'ARN et révélons son existence dans des ovocytes d'axolotl et de xénope. Ce phénomène est observé pour une grande variété de substrats sens et antisens. Les expériences de protection à la RNase montrent que la plupart des molécules d'ARN ont la même polarité que les ARN initialement injectés. Cependant, une très faible quantité d'ARN complémentaire (cRNA) est détectée dans les ARN injectés. La cordycépine abolit toute augmentation du niveau d'ARN, ce qui indique l'existence d'une synthèse d'ARN. Ces résultats mettent en évidence in vivo un mécanisme d'amplification d'ARN, au niveau post-transcriptionnel, au cours du développement. Pour citer cet article : N. Montreau et al., C. R. Biologies 326 (2003).

Mots clés : RNA-dependent RNA synthesis ; cordycepin ; amphibian ; amplification ; development.

Mots clés : synthèse ARN polymérase-ARN dépendante ; cordycépine ; amphibien ; amplification ; développement.