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Contribution de la cytométrie de flux au diagnostic d'une allergie - 01/01/03

Doi : 10.1016/j.allerg.2003.10.001 

N.  Abuaf a * a ,  B.  Rajoely a ,  H.  Gaouar b ,  C.  Pecquet b ,  F.  Leynadier b *Auteur correspondant.

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Résumé

Pour l'exploration d'une allergie in vitro, la cytométrie de flux a rendu accessible des tests cellulaires pratiqués jusque-là par des laboratoires de recherche. L'analyse par cytométrie de l'activation in vitro des polynucléaires basophiles est devenue courante. Après incubation avec l'allergène, les basophiles sont fixés puis marqués avec des anticorps anti-IgE, leur activation est détectée avec les anticorps monoclonaux anti-CD63 ou anti-CD203c. Dans le diagnostic d'une allergie de type immédiat, les tests sur les basophiles sont un complément au dosage des IgE spécifiques. Avec certains allergènes, en particulier médicamenteux, la cytométrie de flux a une sensibilité supérieure au dosage des IgE spécifiques. L'interprétation des résultats peut être délicate, en particulier des concentrations élevées de certains médicaments peuvent se révéler toxiques in vitro. La cytométrie offre aussi l'opportunité d'explorer les allergies ayant pour mécanisme l'immunité cellulaire. La détection de la synthèse de cytokines dans les lymphocytes T ou les basophiles, après incubation avec l'allergène est techniquement au point. Il reste à démontrer l'intérêt diagnostique. L'exploration de l'allergie par la cytométrie de flux est appelée à se développer.

Mots clés  : Allergie ; Polynucléaire basophile ; Cytométrie de flux ; IgE ; CD63 ; CD203c.

Abstract

For the laboratory investigation of allergic diseases, flow cytometric methods to detect leukocytes that have been activated by allergen in vitro have recently been developed. Cellular tests for the detection of in vitro-activated blood basophils are complementary to specific IgE determinations. After in vitro incubation with allergen, basophils are fixed and then labeled with anti-IgE antibodies, and activation is then identified with anti-CD63 or anti-CD203c monoclonal antibodies. Assays based on basophil activation complement the measurement of specific IgE. With some allergens, particularly in cases of drug-induced allergy, flow cytometry has greater sensitivity than specific IgE determination. However, high concentrations of drugs can induce cell toxicity, and this may be confused with basophil activation. Cytometry can also be used to explore allergies with a cell-mediated mechanism. The detection of cytokine synthesis in T cells and basophils incubated with allergen is now technically feasible, but the usefulness of this procedure in the diagnosis of allergy remains to be demonstrated. We believe that the application of flow cytometry to the investigation of allergy is likely to increase.

Mots clés  : Allergy ; Diagnosis ; Basophils ; Flow cytometry ; IgE ; CD63 ; CD203c.

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Vol 44 - N° 1

P. 37-44 - janvier 2004 Retour au numéro
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