Detection of the human Parvovirus B19 in nonimmune hydrops fetalis using immunohistochemistry and nested-PCR in formalin-fixed and paraffin-embedded placenta and fetal tissues - 24/04/09
Détection du Parvovirus B19 dans les anasarques fœtales non immunologiques par immunohistochimie et PCR-nichée dans des tissus fœtaux et placentaires fixés au formol et inclus en paraffine
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Abstract |
The aim of the present study was to determine whether there is an association between Parvovirus B19 infection and hydrops fetalis setting in fetus and neonate. Twenty-nine samples were analyzed by three methods. Each sample was histologically examined for viral nuclear inclusions in fetal organs and placenta, then immunohistochemical study using Parvovirus B19 antibody that recognized the VP2 protein of the Parvovirus B19 capsid was done in tissue embedded in paraffin (lungs, liver, thymus, kidneys, heart and placenta). Nested-PCR analysis was done after DNA extraction from paraffin blocks and using specific primers of the Parvovirus B19 VP1 gene. Apparent causes of hydrops were eliminated such as metabolic diseases, cardiac failure or malformation. The standard histological study objectivates viral inclusion in one case (lung tissue). However, the immunohistochemical study was negative in all cases. Nested-PCR demonstrates the presence of the viral DNA in five cases. Our study demonstrates that the implication of Parvovirus B19 in hydrops fetalis must be affirmed by the use of more than one method. Nested-PCR is the most sensitive method in our study and can be easily used for the detection of Parvovirus B19 in formalin-fixed paraffin-embedded tissues.
Le texte complet de cet article est disponible en PDF.Résumé |
L’objectif de notre étude est de déterminer s’il y a une association entre l’infection virale au Parvovirus B19 et l’anasarque fœtale non immunologique chez les fœtus et les nouveau-nés. Vingt-neuf cas ont été analysés par trois techniques. L’examination histologique a été réalisée pour chaque cas à la recherche des inclusions virales nucléaires dans les tissus fœtaux et placentaires. L’étude immunohistochimique a été faite sur tissus inclus en paraffine (poumons, foie, thymus, reins, cœur et placenta), par l’anticorps anti-Parvovirus B19 dirigé contre la protéine VP2 de la capside du Parvovirus B19. La PCR-nichée a été réalisée après l’extraction de l’ADN à partir de tissus inclus en paraffine, en utilisant des amorces spécifiques du gène VP1 du Parvovirus B19. Les causes apparentes de l’anasarque fœtale ont été éliminées, à savoir les maladies métaboliques, l’insuffisance ou les malformations cardiaques. L’étude histologique standard a révélé l’inclusion virale dans un cas (au niveau du poumon). En revanche, l’étude immunohistochimique était négative dans tous les cas. La PCR-nichée a montré la présence de l’ADN viral dans cinq cas. Notre étude montre que l’implication du Parvovirus B19 dans l’anasarque fœtale non immunologique doit être confirmée par l’utilisation de plusieurs méthodes. La PCR-nichée est la technique la plus sensible dans notre étude et peut être appliquée facilement pour la détection du Parvovirus B19 dans des tissus fixés au formol et inclus en paraffine.
Le texte complet de cet article est disponible en PDF.Keywords : Parvovirus B19, Hydrops fetalis, Immunohistochemistry, Nested-PCR, Histology
Mots clés : Parvovirus B19, Anasarque fœtale, Immunohistochimie, PCR-nichée, Histologie
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Vol 57 - N° 3
P. e1-e7 - mai 2009 Retour au numéroBienvenue sur EM-consulte, la référence des professionnels de santé.
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