Séparation de l'antigène libre de l'antigène lié à l'anticorps par précipitation, filtration ou adsorption - 01/01/03
service d'hématologie et d'immunologie biologique, hôpital Tenon, centre hospitalier universitaire Saint-Antoine, université Pierre et Marie Curie, 4, rue de la Chine, 75970 Paris cedex 20, France .
Résumé |
Pour doser ou isoler un antigène ou un anticorps, il faut séparer la fraction liée de l'antigène (bound : B) de la fraction libre (free : F). L'antigène est radiomarqué, et différents procédés de séparation peuvent être utilisés. Par dialyse, on sépare F de B. F doit être une petite molécule dialysable. Par ultracentrifugation ou gel filtration, on peut aussi séparer B de F. Le test de Farr utilise le sulfate d'ammonium pour précipiter B. L'immunoprécipitation utilise un deuxième anticorps ou la protéine A du staphylocoque qui précipitent B en se liant aux IgG. Des billes magnétiques couplées à l'anticorps ou à la protéine A, permettent d'isoler rapidement un antigène. Le charbon activé est utilisé pour adsorber F.
Mots-clés : immunoprécipitation , RIPA , protéine A du staphylocoque , test de Farr , billes magnétiques , dialyse à l'équilibre , charbon activé
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