L'identification des anomalies moléculaires constitutionnelles du gène RB1 est réalisée en routine à l'institut Curie, dans le cadre de la prise en charge du rétinoblastome. Le bénéfice direct pour les patients et leur famille réside dans la délivrance d'un conseil génétique adapté. La plupart des techniques de recherche de mutations inconnues étant lourdes à mettre en oeuvre ou de sensibilité insuffisante, nous avons choisi une stratégie associant chromatographie liquide haute performance en conditions dénaturantes (DHPLC) et PCR multiplex fluorescente semi-quantitative (QMPSF). L'approche semi-automatisée par DHPLC autorise l'identification des mutations ponctuelles tandis que la QMPSF permet l'identification des délétions ou duplications d'un ou plusieurs exons. Cent quatre-vingt-douze patients d'origine caucasienne ou nord-africaine ont été étudiés. Sur les 102 cas familiaux et/ou bilatéraux et les 90 cas unilatéraux sporadiques, la mutation causale a été identifiée dans 83 (81,5 %) et cinq (5 %) cas, respectivement. Notre spectre mutationnel diffère des séries précédemment publiées, révélant un taux élevé de grandes délétions et de mutations d'épissage.

Cette étude valide l'utilisation de la DHPLC dans l'analyse moléculaire de RB1. Cependant, l'emploi d'une technique complémentaire identifiant les remaniements de grande taille est impératif pour couvrir l'ensemble du spectre mutationnel. Enfin, nous démontrons la faisabilité du diagnostic moléculaire en routine du rétinoblastome, qui se révèle d'un apport précieux dans la prise en charge des familles.