L’hyperaldostéronisme et le diabète sont deux pourvoyeurs d’insuffisance rénale, présentant des mécanismes moléculaires et cellulaires communs, comme le stress oxydant, à l’origine de lésions tubulaires rénales. L’objectif du travail est d’évaluer in vitro le rôle du stress oxydant et l’effet protecteur d’un antioxydant naturel (extrait de thé vert) dans l’apparition de la dysfonction rénale.

Une culture de cellules tubulaires rénales proximales humaines (HK-2) et de rats (culture primaire) sont incubées avec l’aldostérone ou le glucose pour induire l’hyperaldostéronisme et l’hyperglycémie. L’extrait de thé vert est pré-incubé 1 heure avant l’induction du stress. La viabilité cellulaire est quantifiée par Cell Titer® et l’apoptose par cytométrie en flux (Annexine V). L’expression d’enzymes anti-oxydantes (catalase, superoxyde dismutase) et d’un facteur pro-apoptotique (NFκB) sont évalués par western-blot. Le stress oxydant est visualisé avec une sonde fluorescente, la dihydroéthidine.

Les doses croissantes d’aldostérone et de glucose induisent une perte progressive de la viabilité et l’apoptose des cellules rénales. L’hyperaldostéronisme est induit avec 10^-4 mol/L d’aldostérone et l’hyperglycémie avec 6 g/L de glucose pendant 48 heures et le stress de référence est réalisé avec du peroxyde d’hydrogène à 10-3 mol/L pendant 30 minutes. Ces stress induisent une surexpression des enzymes antioxydantes et de NFκB. L’extrait de thé vert à 10 g/L protège les cellules contre l’apoptose, la surexpression de NFκB et stimule l’expression des enzymes antioxydantes.

Le stress oxydant, déjà connu comme stimulateur de NFκB, serait au centre des mécanismes impliqués dans l’hyperaldostéronisme et l’hyperglycémie. La stimulation de l’expression d’enzymes pro-oxydantes par l’extrait de thé vert protègerait les cellules contre l’activation de NFκB, l’apoptose et le stress oxydant.

Ces résultats suggèrent que l’extrait de thé vert pourrait être considéré comme un traitement prophylactique antioxydant de l’insuffisance rénale chez les patients souffrant d’hyperaldostéronisme ou de diabète.