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Étude comparative des alcoolémies obtenues par la méthode officielle par chromatographie en phase gazeuse sur sang total versus méthode enzymatique-ADH automatisée Integra 800 sur plasma - 18/12/07

Doi : 10.1016/j.immbio.2007.02.008 
A. Szymanowicz , S. Magdinier, S. Cuenca, M.-J. Neyron, I. Denis
Laboratoire de biochimie, centre hospitalier, 28, rue de Charlieu, 42328 Roanne cedex, France 

Auteur correspondant.

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Résumé

Nous avons comparé dans des conditions de pratique habituelle de laboratoire, une méthode de dosage enzymatique automatique de l'alcoolémie sur Intégra 800 (Intégra), appliquée en biologie clinique, avec la méthode officielle par chromatographie phase gaz sur sang total (CPGST) et appliquée au plasma (CPGPL). Les dosages sont faits en double sur 110 échantillons de patients accueillis au service d'urgence de notre hôpital. La répétabilité des deux méthodes établie sur un sérum de contrôle à 0,93 g/l est excellente et comparable: coefficient de variation (CV) à 0,66% pour la méthode CPG et 0,70 pour l'Intégra. La reproductibilité est aussi comparable CV de 1,90% pour la CPG et 2,17% pour l'Intégra. La précision des doublets est également d'excellent niveau dans les deux cas avec un avantage pour l'Intégra (r=0,999) qui travaille directement sur le plasma alors que pour la CPG (r=0,995) il est nécessaire de procéder à deux pipetages au cours de l'étape de préparation. La corrélation des trois méthodes est excellente le même coefficient r=0,998 est obtenu. Les équations de la droite selon Passing-Bablock sont respectivement: Y (Intégra)=1,067×(CPGST)+0,015, Y (CPGPL)=1,067×(CPGST)+0,006 et Y (Intégra)=1,006×(CPGPL)+0,008. Après correction des résultats de l'Intégra recalculés d'après l'équation de corrélation, le diagramme des différences établi selon Bland-Altman ne montre que de très faibles écarts entre les deux méthodes (sept rejets/110 résultats). L'étude statistique de la population reçue en état alcoolique se caractérise par: une moyenne d'âge=43,7 ans, la majorité de patients sont des hommes (80%), environ 25% sont dans la tranche d'âge 50-60 ans, il n'y a pas de lien entre l'âge et l'alcoolémie: r=0,0044, l'alcoolémie moyenne=1,82 g/l, et 45% des alcoolémies se situent entre 1 et 2 g/l. La méthode par CPG a confirmé ses qualités en termes de précision et de justesse. La comparaison avec la méthode enzymatique démontre les qualités de cette méthode automatique en termes de précision. Cependant, cette méthode fournit des résultats avec un biais d'exactitude de 8%±4, supérieur à ceux de la CPGST. Cette différence est induite par le milieu analysé: sang total ou plasma, confirmé par la comparaison avec la CPGPL. La méthode enzymatique corrélée, utilisée dans les conditions prévues pour la méthode officielle (dosage et contrôle en double) offre des garanties de qualité analytique qui la placent en position favorable pour une évolution de la réglementation. Ces résultats nécessitent d'être confirmés par d'autres équipes d'experts en alcoolémie. Cette proposition d'évolution de la législation ne remet pas en cause la nécessité que les résultats d'expertises soient interprétés et validés par des biologistes experts compétents, expérimentés et inscrits sur la liste des experts auprès des tribunaux.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Abstract

We report results about a comparative study involving 3 ethanol assay used in practice clinical laboratory conditions: Gas chromatographic method (GC) on whole blood (GCWB) and on plasma (GCPL) and Roche Integra ADH-enzymatic (Integra) ethanol assay on plasma. A correlation study of blood ethanol determinations in duplicate, was conducted on 110 patients admitted at the Emergency Departement. Repeatability tests on serum control level=0,93 g/l, provided coefficients of variation: CVs GC=0,66% and CVs Integra=0,70%. Reproducibility tests on the same control serum resulted in CVs GC=1,90% and CVs Integra=2,17%. Correlation coefficient between GCWB versus Integra and GCWB versus GCPL and GCPL versus Integra are the same: r=0,998. Passing-Bablok equations are respectively: Y(Integra)=1,067×(GCWB)+0,015 and Y (GCPL)=1,067×(GCWB)+0,006 and Y (Integra)=1,006 X (GCPL)+0,008. In the bias corrected Bland-Altman difference plot for Integra recalculated results versus CPGWB only 7 results fell outside. Statistical results on the panel of 110 patients gave: age average=43,7 years, 25% aged 50-60 years, average alcoholemia rate=1,82 g/l (45% between 1,00- 2,00 g/l), 80% are males. There is no correlation between ages versus blood alcohol level: r=0,0044. During this study GC method confirmed his good reproducibility and accuracy. Integra ADH automatic method demonstrates also his good precision. However the enzymatic method gave a positive bias of 8%±4 when compared to GCWB method. The bias is the same with the GCPL method. Evidence is given that this bias depends only from the types of specimens analysed: whole blood or plasma and not from the method, GC or ADH-enzymatic assay. Analytical qualities revealed by the Roche Integra ADH assay and the possibility to correlate the method with GCWB method needs to be confirmed by some others teams before to be a candidate as a third official method for blood alcohol determination in legal medicine.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Mots clés : Alcoolémie, Chromatographie en phase gazeuse, CPG, ADH, Médecine légale

Keywords : Blood alcohol, Gas chromatography, GC, ADH-enzymatic method, Legal medicine


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