Évaluer l’effet de l’immunisation active, à l’aide d’un peptide correspondant à la deuxième boucle extracellulaire des récepteurs adrénergiques (RA) β₁, sur la réactivité de l’aorte isolée de rat Wistar.

Des rats Wistar âgés de neuf semaines ont été activement immunisés pendant trois mois avec un peptide correspondant à la deuxième boucle extracellulaire des RA β₁ humains. Les immunoglobulines G (IgG) spécifiques ont été caractérisées par Elisa et quantifiées par la méthode BCA. Leur fonctionnalité a ensuite été testée dans des cardiomyocytes ventriculaires isolés (CVI). Des anneaux d’aorte de rats témoins ou immunisés ont été montés dans des cuves à organes isolés. Ensuite, des courbes de contraction à la phényléphrine (1nM à 300μM) ou de relaxation à l’acétylcholine (1nM à 100μM) et l’isoprénaline (1nM à 30μM) ont été établies.

Dans les CVI, les IgG anti-RA β₁ (10 ou 25μg/mL) induisent une augmentation du raccourcissement cellulaire dépendante de la concentration. L’effet inotrope positif induit par l’isoprénaline (10nM et 1μM) est fortement réduit dans les CVI incubés en présence de 25μg/mL d’IgG pendant trois heures. Dans l’aorte de rats immunisés, la contraction à la phényléphrine et la relaxation à l’acétylcholine sont significativement altérées. En revanche, la relaxation induite par l’isoprénaline est conservée.

Cette étude confirme que les anticorps dirigés contre la deuxième boucle extracellulaire des RA β₁ induisent un effet inotrope positif dans les cardiomyocytes isolés de rat adulte. Elle montre aussi, pour la première fois, que les rats immunisés présentent une altération de la fonction endothéliale, mais une conservation de la relaxation adrénergique β.

To evaluate the effect of active immunization with a peptide corresponding to the second extracellular loop of the human beta1-adrenoceptors (β₁-AR) on the reactivity of Wistar rat isolated aorta.

Nine-week-old Wistar rats were actively immunized for 3months with a peptide corresponding to the second extracellular loop of the human β₁-AR. Specific immunoglobulins G (IgG) were characterized by Elisa and the bicinchonic acid protein assay and their functionality were tested in isolated ventricular cardiomyocytes (IVC) from control rats. Aortic rings isolated from control or immunized rats were mounted in organ baths. Then, contractile curves to phenylephrine (1nM to 300μM) and relaxant curves to acetylcholine (1nM to 100μM) and isoprenaline (1nM to 30μM) were established.

Cell shortening increased dose-dependently in rat IVC superfused with IgG containing β₁-AR antibodies (10 or 25μg/mL). Isoprenaline-induced positive inotropy was strongly reduced in IgG containing β₁-AR antibodies preincubated (3h) IVC. Phenylephrine–and acetylcholine–induced aortic responses were greatly inhibited in immunized rats compared to control ones. However, active immunization did not influence the isoprenaline-mediated relaxation.

The present work confirms that β₁-AR antibodies directed against the second extracellular loop of β₁-AR induce a positive inotropic effect in adult rat IVC. Moreover, we demonstrated, for the first time, that 3-month immunization with β₁-AR peptide was associated with altered aortic endothelial function without change in the β-AR-mediated vasorelaxation.