A stability-indicating high performance liquid chromatography (HPLC) method was developed for the analysis of florfenicol in presence of its two available identified degradation products (thiamphenicol and chlorfenicol). The drug was subjected to different International Conference On Harmonisation (ICH) prescribed stress conditions (hydrolysis, oxidation and photolysis). The products formed under different stress conditions were investigated by liquid chromatography (LC) and liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS). The LC method involved a Knauwer Eurospher C18 thermostated column at 25°C; and ammonium acetate buffer 6.49mM (pH adjusted to 4.5)–methanol (70:30 v/v) as mobile phase. The flow rate and detection wavelength were 1ml/min and 225nm respectively. The drug showed instability under acidic, alkaline and photolytic stress conditions mainly in solution state form; however, it remains stable in solid state form and under oxidative stress conditions. The developed method was validated for linearity, precision, accuracy and specificity. The degradation products were characterized by LC-MS. Through the mass/ionization (m/z) values and fragmentation patterns, two principal degradation products listed in bibliography have been shown: the florfenicol amine and thiamphenicol. Based on the results, a more complete degradation pathway of the drug could be proposed.

Une méthode de chromatographie liquide indicatrice de stabilité a été développée pour l’analyse de florfénicol en présence de ces deux produits de dégradation connus et disponibles (thiamphénicol et chlorfénicol). La substance a été soumise aux différentes conditions de dégradation forcée prescrites par la Conférence internationale d’harmonisation (ICH) (hydrolyse, oxydation et photolyse). Les produits formés dans les différentes conditions de dégradation forcée sont analysés par chromatographie liquide (CL) et chromatographie liquide-spectrométrie de masse (CL-SM). La CL implique une colonne C18 Knauwer Eurospher, thermostatée à 25°C, et comme phase mobile, tampon acétate d’ammonium 6,49mM (pH ajusté à 4,5)–méthanol (70:30 v/v). Le débit et la longueur d‘onde sont respectivement 1mL/min et 225nm. La substance médicamenteuse a été démontrée comme étant instable dans les conditions de dégradation forcée d’acide, basique et photolyse, notamment sous la forme d’une solution ; cependant, elle reste stable à l’état solide et dans les conditions de stress oxydatif. La méthode développée a été validée pour linéarité, fidélité, exactitude et spécificité. Les produits de dégradation ont été caractérisés par CL-SM. À partir du rapport masse–charge d’ionisation (m/z) et les modèles de fragmentation, deux principaux produits de dégradation inscrits en bibliographie ont été démontrés : le florfénicol amine et le thiamphénicol. En se basant sur ces résultats, un schéma de dégradation plus complet de la substance médicamenteuse peut être proposé.