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P206: La citrulline : un régulateur direct de la fonction mitochondriale via une inhibition du complexe I - 24/12/14

Doi : 10.1016/S0985-0562(14)70848-9 
A. Goron 1, H. Dubouchaud 1, E. Fontaine 1, C. Moinard 1, 2
1 Laboratoire de bioénergétique fondamentale et appliquée (LBFA), Inserm, U1055, Grenoble 
2 Université Paris Descartes, Paris, France 

Résumé

Introduction et but de l’étude

Plusieurs études ont montré que la citrulline (CIT) avait un rôle majeur sur l’homéostasie énergétique musculaire1. Cependant, le mécanisme reste à déterminer. Nous proposons que la CIT pourrait directement moduler la respiration mitochondriale.

Matériel et méthodes

Les mitochondries des gastrocnemius de rats adultes ont été isolées par centrifugations différentielles2. La consommation mitochondriale en oxygène (0,2 mg protéines. ml−1)des complexes I et II a été mesuré à 37°C en utilisant une électrode de Clark et en ajoutant successivement les différents substrats nécessaires pour les mesures en conditions basales (état II), phosphorylantes (état III) et non-phosphorylantes (état IV), en présence de CIT 5mM (CIT) ou non (Contrôle). De plus, la consommation de NADH du complexe I isolé a également été mesurée en utilisant une méthode spectrophotométrique.

Résultats et Analyse statistique


Complexe I (Glutamate 5,5mM /Malate 2,5mM)Complexe II (Succinate 5,5mM/Rotenone 2,5μM)ContrôleCITContrôleCITÉtat II6,3±0,27,1±0,418,1±1,718,6±2,0État III (ADP 1 mM)92,7±6,568,1±3,6*60,7±6,160,6±7,6État IV (Oligomycine 0,25μg/ml)5,9±0,16,4±0,314,3±1,514,1±2,4

 Complexe I (Glutamate 5,5mM /Malate 2,5mM)  Complexe II (Succinate 5,5mM/Rotenone 2,5μM) 
Contrôle CIT Contrôle CIT 
État II 6,3±0,2 7,1±0,4 18,1±1,7 18,6±2,0 
État III (ADP 1 mM) 92,7±6,5 68,1±3,6* 60,7±6,1 60,6±7,6 
État IV (Oligomycine 0,25μg/ml) 5,9±0,1 6,4±0,3 14,3±1,5 14,1±2,4 

La consommation en oxygène est exprimée en nmol O2.min−1.mg prot−1.Les résultats sont exprimés comme la moyenne ± SEM. n =8 pour le complexe I et n =6 pour le complexe II. * p<0,01 vs. Contrôle (Student t-test).

De plus, l’étude sur complexe I isolé a permis de montré que l’action de la CIT était directe (-50 % consommation de NADH, p<0,01 vs Contrôle).

Conclusion

Ce travail montre pour la première fois que la CIT est un inhibiteur direct du complexe I. Les mécanismes d’actions restent cependant à déterminer.

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Vol 28 - N° S1

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