Purpose: To investigate cell tolerance of three tear substitutes used in the treatment of dry eye syndromes.

Methods: Cytotoxicity tests were done on a continuous human conjunctival cell line using microplate cold light cytofluorimetry. Membrane integrity, DNA condensation and reactive oxygen species (ROS) production (hydrogen peroxyde and superoxide anion) were evaluated after 15 minutes of treatment or 15 minutes and 24 hours of cell recovery. Hyaluronic acid, hydroxypropyl methylcellulose associated with sodium perborate (HPMC) and carbomer 934P were tested at their commercial concentrations (respectively 0.18%, 0.3% and 0.3%) and after a 1/10 dilution.

Results: Cell viability and chromatin condensation were not altered by hyaluronic acid for all concentrations and times tested. A decrease in membrane integrity was observed with 0.3% carbomer 934P after 24 hours of cell recovery and with 0.3% HPMC after 15 minutes. This decrease was amplified after 24 hours and associated with an apoptotic phenomenon. A H ₂ O ₂ production was observed with HPMC associated with sodium perborate and an O ₂ production was found with hyaluronic acid diluted at 1/10.

Conclusion: Hyaluronic acid, carbomer and HPMC are in vitro well-tolerated even if HPMC induces a more important decrease of cell viability compared to the other drugs. Hyaluronic acid, with its rheologic properties, with no in vitro toxicity, seems to be efficient for dry eye patients.

Buts de l'étude : L'objet de ce travail est d'évaluer in vitro la tolérance cellulaire de trois substituts lacrymaux utilisés dans le traitement des syndromes secs.

Matériel et méthodes : Des tests de cytotoxicité ont été réalisés sur une lignée de cellules conjonctivales humaines par microtitration cytofluorimétrique en lumière froide. L'intégrité membranaire, la condensation de la chromatine, et les espèces réactives de l'oxygène (peroxyde d'hydrogène et anion superoxyde) ont été mesurées après un traitement de 15 minutes ou de 15 minutes suivies de 24 heures de récupération cellulaire. Ont été testés l'acide hyaluronique, l'hydroxypropyl méthylcellulose associé au perborate de sodium (HPMC) et le carbomère 934P à leurs concentrations commerciales (respectivement 0,18 %, 0,3 % et 0,3 %) et après dilution au 1/10.

Résultats : L'acide hyaluronique n'altère ni l'intégrité membranaire ni la condensation de la chromatine quels que soient la concentration et le temps de contact. Le carbomère 934P à 0,3 % entraîne une diminution de l'intégrité membranaire après 24 heures de récupération cellulaire. L'HPMC à 0,3 % entraîne une chute de ce paramètre dès 15 minutes, chute amplifiée après 24 heures et associée à un phénomène d'apoptose. Une augmentation de la production de peroxyde d'hydrogène n'est observée qu'avec l'HPMC associé au perborate de sodium, alors que seul l'acide hyaluronique dilué au 1/10 permet de retrouver de l'anion superoxyde.

Conclusion : L'acide hyaluronique, le carbomère et l'HPMC n'entraînent que peu de toxicité in vitro même si la diminution de l'intégrité membranaire observée avec l'HPMC est légèrement plus importante. L'acide hyaluronique, grâce à ses qualités rhéologiques et en l'absence de toxicité in vitro constitue cependant une avancée importante dans la prise en charge des syndromes secs.