Expérimental/mécanismes cellulaires et moléculaires.

La concentration plasmatique de citrulline (Cit) est essentiellement déterminée par l’équilibre entre sa production intestinale et sa conversion rénale en arginine. Cette production intestinale dépend d’une enzyme, l’ornithine carbamyl transférase (OCT), qui permet de convertir l’ornithine en Cit. Nos travaux ont montré qu’à dose pharmacologique la Cit active la synthèse protéique musculaire. Notre hypothèse était que l’OCT intestinale, en contrôlant la disponibilité de la Cit, pourrait être un élément clé de l’homéostasie protéique musculaire, hypothèse que nous avons voulu tester par une invalidation de l’enzyme. Toutefois, l’OCT est également exprimée par les hépatocytes et la déficience en OCT à la naissance est associée à une mortalité précoce. Nous avons donc eu recours à un modèle d’invalidation conditionnelle de l’OCT intestinale (OCT^Cre-Lox) permettant d’induire une délétion spécifique de l’enzyme intestinale chez des souris adultes.

Des souris OCT^Cre-Lox ont été obtenues en croisant des souris transgéniques OCT^Lox avec des souris transgéniques exprimant une protéine de fusion formée par la recombinase Cre et le domaine de liaison au tamoxifène sous le contrôle d’un promoteur spécifique de l’intestin (villine). Seules des souris sauvages mâles (Wt, n=6) et OCT^Cre-Lox (n=12) ont été utilisées pour nos expériences. Les souris Wt et la moitié des souris OCT^Cre-Lox (oct) ont reçu une administration quotidienne IP de tamoxifène (75mg/kg/j dans de l’huile de maïs) pendant 5 jours. Les autres souris OCT^Cre-Lox (OCT) ont reçu de l’huile de maïs IP. Les souris ont été ensuite suivies pendant 2 mois sur le plan de l’évolution pondérale, de la consommation alimentaire et de la citrullinémie. Lors de l’euthanasie, nous avons déterminé l’aminoacidogramme plasmatique et la masse maigre (poids de la carcasse). Statistiques : ANOVA suivi d’un test PLSD de Fisher ; significativité p<0,05.

Dès j7 et jusqu’à la fin de l’étude, les souris oct ont présenté une concentration plasmatique très faible de Cit (Wt : 44±13μmol/l, OCT : 33±10μmol/l, oct : 4±2μmol/l ; p<0,05 Wt et OCT vs oct). La consommation alimentaire, l’évolution pondérable, la masse maigre globale (Wt : 13,3±0,8g, OCT : 16±3g, oct : 12,3±0,5g ; NS), et l’amino acidogramme (en dehors d’une légère diminution de la phénylalaninémie dans le groupe oct) ne différaient pas entre les groupes lors de l’euthanasie.

Nos résultats ne sont pas en faveur d’un rôle majeur de la production intestinale de Cit dans la régulation physiologique de l’homéostasie des protéines musculaires. Il est à noter que les effets pharmacologiques de Cit sont observés à des concentrations plasmatiques de l’ordre de 1000μmol/l.