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Risque génotoxique et ovocytes : principes de toxicologie génétique et applications - 06/09/13

Doi : 10.1016/j.gyobfe.2013.07.008 
A. Berthelot-Ricou a, b, J. Perrin a, c, T. Orsière a, M. Aye d, A. Roustan d, A. Botta a, B. Courbiere a, , e
a FR CNRS 3098, ECCOREV, UMR CNRS 7263 AMU, IMBE, biogénotoxicologie, santé humaine & environnement, faculté de médecine, Aix-Marseille université, 27, boulevard Jean-Moulin, 13005 Marseille, France 
b Département de gynécologie-obstétrique, pôle femme-mère-enfant, centre hospitalier Félix-Guyon, CHU de la Réunion, 97405 Saint-Denis, Réunion 
c CECOS, laboratoire de biologie de la reproduction, pôle de gynécologie-obstétrique et reproduction, Gynépôle, AP–HM La Conception, 147, boulevard Baille, 13005 Marseille, France 
d Laboratoire de mutagenèse et toxicologie environnementales, IMBE, faculté de pharmacie, Aix-Marseille université, 27, boulevard Jean-Moulin, 13005 Marseille, France 
e Pôle de gynécologie-obstétrique et reproduction, Gynépôle, AP–HM La Conception, 147, boulevard Baille, 13005 Marseille, France 

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Résumé

L’application de tests de génotoxicité sur cellules germinales vise à évaluer l’impact d’une exposition à une substance potentiellement mutagène qui pourrait constituer un risque pour la fertilité ou pour la descendance des individus exposés. Le test des comètes sur ovocytes matures de souris est un test simple, reproductible et rapide pour étudier la survenue de lésions primaires de l’ADN sur les ovocytes. Ce test permet de compléter des tests de toxicologie génétique réalisés en première intention sur des cellules somatiques, et pourrait trouver de nombreuses applications en reprotoxicologie concernant l’étude de l’impact des facteurs environnementaux sur les cellules germinales féminines. Nous décrivons une application pratique de ces tests en biologie de la reproduction avec l’étude de la génotoxicité des cryoprotecteurs utilisés à haute concentration pour la vitrification des ovocytes. Ces tests nous ont permis de démontrer l’absence de génotoxicité du diméthylsulfoxide (DMSO) et de l’éthylène glycol (EG) sur les ovocytes et nous ont conduits à émettre l’hypothèse d’une génotoxicité du 1,2-propanediol (PrOH) à haute concentration.

Le texte complet de cet article est disponible en PDF.

Abstract

The aim of genotoxicity tests in germ cells is to assess the impact of exposure to environmental mutagens that may represent a risk for the fertility or for the offspring of exposed subject. The comet assay on mature mouse oocytes is a simple, reproductive and rapid test to study primary DNA damage in oocytes. This test is used to complete toxicology assays applied in first line to somatic cells, and could find many applications in reproductive toxicology to study impact of environmental factors on female germ cells. We describe a practical application of comet assay in reproductive biology to assess the genotoxicity of cryoprotectants used at high concentrations in oocyte vitrification protocols. This test allowed us to demonstrate that dimethylsulfoxide and ethylene glycol are non-genotoxic for the mouse oocytes and led us to hypothesize a genotoxic effect of 1,2-propanediol (PrOH) at high concentrations after having observed induction of significant DNA damage on CHO cell line and on mouse oocytes.

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Mots clés : Test des comètes, Ovocyte, Lésions de l’ADN, Génotoxicité, Cryoprotecteurs

Keywords : Comet assay, Oocyte, DNA damage, Genotoxicity, Cryoprotectant


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Vol 41 - N° 9

P. 544-547 - septembre 2013 Retour au numéro
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