Le profil mutationnel d’une série importante de mélanome cutané (MC) a été étudié pour préciser la fréquence des mutations non ^V600E et la présence éventuelle dans une même tumeur de mutation(s) additionnelle(s) des 2 autres gènes majeurs NRAS et C-KIT notamment chez les patients avec mutation BRAF non ^V600E, donnée inédite dans la littérature. Les données cliniques, histologiques et immuno-histochimiques (IHC) ont été plus particulièrement analysées chez les patients avec mutation BRAF non ^V600E.

Le statut mutationnel de l’exon 15 de BRAF, des exons 2 et 3 de NRAS et des exons 11, 13 et 17 de C-KIT a été analysé chez 325 patients atteints de MC. Les mutations de BRAF (n=325) et de NRAS (n=154) ont été recherchées par HRM sur le LightCycler^® 480 ou par PCR spécifique d’allèle sur le Cobas^® 4800, puis confirmées par séquençage capillaire. Les mutations de C-KIT (n=267) ont été recherchées par séquençage capillaire. Cette étude moléculaire a été complétée d’une analyse histologique et en IHC utilisant l’anticorps VE1 reconnaissant en principe uniquement les formes mutées ^V600E de la protéine BRAF.

Parmi les 325 patients, 150 présentaient des mutations BRAF dont 110 ^V600E et 32 non ^V600E (soit 21,3 %), dont 21 mutations ^V600 non E, majoritairement ^V600K (n=18) et 11 mutations non ^V600 faux-sens ou insertion/délétion sur les aa 594 (n=3), 596 (n=2), 597 (n=1), 599 (n=3), 601 (n=2), dont une mutation composite ^V600V/Lys601Glu ; huit mutations BRAF^V600 détectées par la technique Cobas^® n’ont pas pu être identifiées par séquençage par défaut de matériel. Parmi les 154 prélèvements dont le gène NRAS a été séquencé, une mutation a été détectée chez 3/11 patients avec mutation BRAF non ^V600 (soit 27 % de ces patients), 0/21 chez les patients avec mutation BRAF^V600 et 21 chez les patients avec BRAF non muté. Aucun des 32 patients porteurs de mutations BRAF non ^V600E n’avaient de mutation C-KIT, ni de profil histologique particulier et l’IHC avec l’anticorps VE1 était régulièrement négative. Aucun profil clinique particulier ne se détachait chez les 32 patients avec mutation BRAF non ^V600E et en particulier chez les 3 co-mutés NRAS/BRAF. Un traitement anti-BRAF n’a été utilisé que chez un patient porteur d’une mutation BRAF non ^V600 sur l’acide aminé 599, avec un décès rapide dans le cadre d’une maladie agressive et multimétastatique.

La fréquence des mutations BRAF non ^V600E dans le MC n’est donc pas négligeable, mais n’est apparemment pas associée à un phénotype clinique ou histologique particulier. La spécificité de l’anticorps VE1 en IHC vis-à-vis de la mutation ^V600E semble se confirmer. La présence de co-mutations BRAF/NRAS est une donnée nouvelle et semble spécifique des mutations non ^V600.

Ces données à mieux analyser sur le plan moléculaire (coexistence de deux clones mutés ou co-mutation à l’échelle cellulaire) auront probablement des incidences thérapeutiques à préciser.