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A 'one minute' trehalase detection test for the identification of candida glabrata - 04/03/08

Doi : JMM-03-2001-11-1-1156-5233-101019-ART5 

F. Parant [1],

A.-M. Freydière [1],

Y. Gille [1],

P. Boiron [2],

F.C. Odds [3]

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Introduction

Candida glabrata , one of the most common pathogenic Candida species, is frequently resistant to fluconazole. Its rapid identification is therefore imperative for prompt institution of appropriate antifungal therapy. We have developed a 'one minute' strip test for C. glabrata , based on a commercially available glucose oxidase test and which involves no incubation period. This test is based on the ability of C. glabrata to hydrolyze trehalose rapidly.

Materials and Methods

To assess the performance of this test, 109 stock isolates and 5 reference strains representing a total of 15 different yeast species were grown on three formulations of Sabouraud agar and four chromogenic agar media. The colonies were tested for trehalase activity after 24 and 48 h of growth at 30 °C.

Results

On Albicans ID2, Candida ID and CandiSelect agars, 100 % of 58 C. glabrata isolates were identified in 30 seconds after incubation for 24 h and 48 h. Depending on the medium, 1 to 2 of 18 C. tropicalis isolates tested yielded a false-positive result. The test could not be performed on colonies grown on CHROMagar Candida. For isolates grown on Sabouraud agar, depending on the formulation, the test sensitivities varied from 55 % to 100 % and 74 % to 100 % after incubation for 24 h and 48 h respectively. The specificity was 100 % on all three formulations. For yeasts isolated on chromogenic media, because some Candida species can be recognized directly, only the non-identifiable colonies need to be tested, reducing handling, reagent consumption, time and cost. A simultaneous test for maltose breakdown, using the same principle as the trehalose test, allowed a clear discrimination between 15 isolates of C. glabrata and 6 isolates of C. tropicalis , including the two that gave false-positive trehalase results.

Conclusion

This rapid trehalase detection test offers a particularly simple, rapid and economic method for C. glabrata identification.

Identification, en une minute, des colonies deCandida glabrata par détection de la trehalase

Introduction

Candida glabrata, une des espèces de Candida parmi les plus fréquemment isolées, est souvent résistante au fluconazole. Son identification rapide est donc impérative pour instaurer au plus vite un traitement antifongique adapté. Un test de détection de la trehalase en une minute sur bandelette, ne nécessitant aucune incubation préalable, utilisant une glucose oxydase pour la détection du glucose et seulement 1 à 2 colonies de levures, a été développé dans notre laboratoire.

Matériel et Méthode

Pour évaluer ce test d'identification de C. glabrata , 109 souches de collection et 5 souches de référence représentant un total de 15 espèces de levures différentes ont été testées après subculture sur 3 formules de milieu Sabouraud et sur 4 milieux chromogéniques. Les colonies ont été testées après 24 puis 48 h d'incubation à 30 °C.

Résultats

Après 24 h puis 48 h d'incubation, 100 % des 58 souches de C. glabrata subcultivées sur les milieux Albicans ID2, Candida ID et CandiSelect ont donné un résultat positif en 30 secondes et selon les milieux, 1 à 2 souches sur les 18 souches de C. tropicalis testées ont donné un résultat faussement positif. Le test s'est montré inapplicable aux colonies cultivées sur CHROMagar Candida. Sur les trois formulations de milieux Sabouraud, la sensibilité du test varie de 55 à 100 % et de 74 à 100 % après 24 puis 48 h d'incubation respectivement. Par contre la spécificité est de 100 % aux deux temps d'incubation. Les milieux chromogéniques permettant l'identification directe de certaines souches par la couleur des colonies, sur ces milieux, le test n'est pratiqué que sur les colonies non-identifiées, réduisant ainsi le coût de l'identification. Un test simultané au maltose, utilisant le même principe que le test au tréhalose, pratiqué sur 15 souches de C. glabrata et 6 souches de C. tropicalis dont les 2 souches faussement positives, a permis de distinguer clairement les souches des deux espèces.

Conclusion

Ce test de détection de la tréhalase est simple, rapide et économique.


Mots clés : Levure. , Identification. , Tréhalose. , Milieux chromogéniques.

Keywords: Yeast. Identification. , Trehalose. , Chromogenic media.


Esquema



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Vol 11 - N° 1

P. 26 - juin 2001 Regresar al número
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  • Genotypic study of Saccharomyces boulardii compared to the Saccharomyces sensu stricto complex species
  • M. Mallié, P. Nguyen Van, S. Bertout, C. Vaillant, J.-M. Bastide
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  • Première identification de Candida dubliniensis au Centre Hospitalier Universitaire de Brest (France)
  • V. Moalic, E. Moalic, V. Bellein, J. Jezequel, M. Garre, C. Berthou, A.-M. Le Flohic

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