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Anticandidal synergistic activity of green tea catechins, antimycotics and copper sulphate as a mean of combinational drug therapy against candidiasis - 07/03/17

Doi : 10.1016/j.mycmed.2016.08.004 
J. Anand, N. Rai
 Department of Biotechnology, Graphic Era University, 566/6 Bell Road, Clement Town, Dehradun, Uttarakhand 248002, India 

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Summary

The present investigation aims at evaluating synergistic herbal based composition of purified catechins with fluconazole, amphotericin B and copper sulphate against Candida albicans (MTCC 3017) and Candida glabrata (MTCC 3019). The catechins were isolated from green tea leaves of Assam, Himachal Pradesh and Uttarakhand regions of India. The synergistic activity of combinations against Candida species was assessed following microdilution checkerboard technique and time kill assay. The inhibitory action of most significant combination on treated Candida cells was assessed by scanning electron microscopy. Cytotoxicity of synergistic compositions was further analyzed by performing MTT assay on Vero cell lines. Purified catechins of Assam and Himachal Pradesh green tea showed synergistic activity with fluconazole and amphotericin B against Candida species. Time kill assay depicted synergistic activity at minimum inhibitory concentration and twice of minimum inhibitory concentration of purified catechins and antimycotics. Further, Copper sulphate increased anticandidal efficacy of synergistic combinations by 0.4% to 6.63%. SEM analysis revealed morphological distortions of treated Candida cells. Cytotoxicity analysis of synergistic composition depicted high percentage viability (≥91.4% to100%) of Vero cell line, which suggests non-cytotoxic activity of proposed composition on healthy cells. It can be inferred that present evaluated synergistic composition can confer promising anticandidal efficacy and requires further investigation of safety and translational guidelines for effective and safer green tea based potent therapeutic drug.

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Résumé

La présente enquête vise à évaluer synergique composition à base d’herbes de catéchines purifiées avec le fluconazole, l’amphotéricine B et de sulfate de cuivre contre Candida albicans (MTCC 3017) et Candida glabrata (MTCC 3019). Les catéchines ont été isolés à partir de feuilles de thé vert de l’Assam, Himachal Pradesh et Uttarakhand régions de l’Inde. L’activité synergique des différentes combinaisons contre les espèces de Candida a été évaluée suivant la technique de microdilution en damier et un essai de tuer le temps. L’action inhibitrice de la plus importante combinaison(s) sur les cellules de Candida traitées a été évaluée par microscopie électronique à balayage. Cytotoxicité des compositions synergiques a en outre été analysée en réalisant un test MTT sur des lignées cellulaires Vero. catéchines purifiées de thé vert Assam et de l’Himachal Pradesh ont montré une activité synergique avec le fluconazole et l’amphotéricine B contre les espèces de Candida. Temps de dosage tués représenté une activité synergique à une concentration minimale inhibitrice (CMI) et deux fois la concentration minimale inhibitrice (2MIC) des catéchines et des antimycotiques purifié. En outre, le sulfate de cuivre a augmenté l’efficacité anticandidal des combinaisons synergiques de 0,4 % à 6,63 %. Analyse par MEB a révélé des distorsions morphologiques des cellules de Candida traitées. Analyse de la cytotoxicité de la composition synergique représentée une viabilité élevée en pourcentage (% aux91,4100 %) de la lignée cellulaire Vero qui suggère une activité non cytotoxique de la composition proposée sur les cellules saines. Dans l’on peut déduire que présente composition synergique évaluée peut conférer une efficacité prometteuse anticandidal et nécessite une enquête plus approfondie sur la base de directives de sécurité et de traduction pour le développement de médicaments thérapeutiques puissants à base de thé vert efficace et plus sûre.

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Keywords : Green tea catechins, Synergistic, SEM, Cytotoxicity, Candida

Mots clés : Vert catéchines du thé, Synergique, SEM, Cytotoxicité, Candida

Abbreviations : EGCg, GT, AT, HP, IP, PN, CU, Flu, AmB, YPD Agar, YPD broth, MIC


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Vol 27 - N° 1

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