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The expression of CD47 and its association with 2,3-DPG levels in stored leuco-reduced blood units - 01/02/19

L’expression de CD47 et son association avec 2,3-DPG dans des stockées leuco-réduites des unités de sang

Doi : 10.1016/j.tracli.2019.01.004 
Nermeen A. Eldesouky a , Randa M. Abo El Fetouh b , Ahmed Abdel Hafez a , Alaa Gad a, , Maha M. Kamal b
a Department of Clinical and Chemical Pathology, Faculty of Medicine, Cairo University, Cairo, Egypt 
b National Cancer Institute, Cairo University, Cairo, Egypt 

Corresponding author at Department of Clinical and Chemical Pathology, Faculty of Medicine, Cairo University, 6A Aswan Square, El Mohandeseen, Giza 12311, Egypt.Department of Clinical and Chemical Pathology, Faculty of Medicine, Cairo University6A Aswan Square, El MohandeseenGiza 12311Egypt
En prensa. Pruebas corregidas por el autor. Disponible en línea desde el Friday 01 February 2019
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Abstract

Background

Red blood cell (RBC) aging in transfusion medicine is characterized by alteration of many biochemical and morphological integrity of the cell referred to as red cell storage lesion (RCSL), CD47 is a protective marker expressed on RBCs that salvage the cell from phagocytosis. 2,3-diphosphoglycerate (2,3-DPG) tends to have a greater affinity towards deoxygenated hemoglobin. Any oxygen unloading at tissue capillaries are facilitated by 2,3-DPG, and any alterations in its levels can significantly interfere with oxygen release. Alteration of both CD47 expression and 2,3-DPG levels during red cell storage may serve as markers in the development of RCSL. The aim of this study was to validate the impact of storage time and leuco-depletion on CD47 expression on the RBCs, which could be a prospective marker for detection of RBCs viability and to clarify if the changes in CD47 expression and 2,3-DPG levels are correlated during storage of Packed RBCs.

Subjects and methods

One hundred samples from Packed RBCs units were divided into two groups [Group 1 comprised unfiltered packed red cell units (n=50), whereas Group 2 included filtered “leuco-reduced” red cell units (n=50)]. Collection of samples was executed on days 0, 1 and 21. Each sample was measured for 2,3-DPG and alteration of CD47 expression on RBC using flow cytometry.

Results

Decreased CD47 expression along the storage period was statistically significant in both groups (P<0.05). Interestingly, the expression of CD47 was significantly higher in group 2 than group 1 on day zero, 1st and 21st days (P<0.05). Additionally, a statistically significant decrease in 2,3-DPG level was detected at day 21 of storage in group 1 compared to group 2 with a P-value of <0.001. There was a significant positive correlation (r=0.570, P<0.001) between CD47 MFI on RBC during storage and the level of 2,3-DPG at day 21 from packed RBCs storage.

Conclusion

Older unfiltered RBC possesses lower expression of CD47 and low levels of 2,3-DPG, however filtration (leucoreduction) of RBCs units may help to retain considerable levels of 2,3-DPG and CD47 and hence sustains preservation of RBCs through reduction of phagocytosis.

El texto completo de este artículo está disponible en PDF.

Résumé

Contexte

Les globules rouges, âgés en médecine transfusionnelle se caractérisent par un changement de plusieurs intégrités biochimiques et morphologiques de la cellule, appelées lésions des globules rouges stockées, le CD 47 est un marqueur protecteur exprimé sur les globules rouges qui sauvent la cellule de la phagocytose. Le 2,3-diphosphoglycerate (2,3-DPG) tend à avoir une plus grande affinité pour l’hémoglobine désoxygénée. Une altération dans l’expression de CD47 et le niveau de 2,3-DPG durant le stockage des globules rouges peut être utiliser qu’un marqueur dans le développement de lésions des globules rouges stockées. Le but de cette étude était de valider l’effet de stockage ainsi que l’effet de la leucodéplétion sur l’expression de CD47 aux globules rouges. CD47 pourrait être considerer un marqueur prospectif pour détecter la viabilité des globules rouges et d’évaluer la possible association entre l’expression de CD47 et 2,3-DPG pendant le stockage de globules rouges.

Sujets et méthodes

Cent échantillons d’échantillons de globules rouges emballés ont été divisés en deux groupes [le groupe 1 comprenait des unités de globules rouges concentrés non filtrées (n=50), tandis que le groupe 2 comprenait des unités de globules rouges filtrées « réduites en leuco » (n=50)]. La collecte des échantillons a été effectuée aux jours 0, 1 et 21. Chaque échantillon a été mesuré pour 2,3-DPG et altération de l’expression de CD47 sur les globules rouges en utilisant une cytométrie en flux.

Résultats

Une diminution de l’expression de CD47 au cours de la période de stockage était statistiquement significative dans les deux groupes (p<0,05). Fait intéressant, l’expression de CD47 était significativement plus élevée dans le groupe 2 que dans le groupe 1 les jours zéro, 1er et 21ej (p<0,05). En outre, une diminution statistiquement significative du niveau de DPG de 2,3 a été détectée au 21ej de stockage dans le groupe 1 par rapport au groupe 2 avec une valeur de p<0,001, il existait une corrélation positive significative (r=0,570, p<0,001) entre le CD47 MFI sur les GR pendant le stockage et le niveau de 2,3-DPG au jour 21 à partir du stockage des GR concentrés.

Conclusion

Un RBC plus ancien et non filtré possède une expression plus faible de CD47 et une faible niveaux de 2,3-DPG, cependant la filtration (leucoréduction) des unités de RBC garantit de maintenir de niveaux considérables de 2,3-DPG et CD 47 et soutient donc la préservation des RBC grâce à la réduction de la phagocytose.

El texto completo de este artículo está disponible en PDF.

Keywords : CD47, 2,3-DPG, RCSL, Leuco-depletion, Flow cytometry

Mots clés : CD47, 2,3-DPG, Leucodéplétion, Cytométrie en flux


Esquema


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