Le génotypage RHD fœtal sur sang maternel est une technique fiable et non invasive qui permet d’adapter la prévention de l’allo-immunisation anti-RH1 chez les femmes enceintes RH :-1 non immunisées, et d’optimiser la prise en charge obstétricale des femmes enceintes RH :-1 allo-immunisées. Cette méthode a été validée en l’adaptant aux contraintes logistiques et techniques rencontrées : extension du délai de traitement des échantillons à 5jours après prélèvement, utilisation de tubes secs avec gel séparateur. La faible quantité d’ADN fœtal présent, ainsi que la présence d’ADN maternel en quantité supérieure à l’ADN fœtal, sont des limites de la méthode, impliquant lors de l’étape de validation des résultats la prise en compte de plusieurs critères (âge gestationnel, profil des courbes, homogénéité de l’amplification). Comme pour toute technique de biologie moléculaire, des procédures sont mises en place et doivent être strictement respectées pour éviter les contaminations inter-échantillons ; de même, des témoins positif et négatif, un « blanc échantillon » et un gène contrôle sont inclus dans chaque série, et leurs Résultats vérifiés avant validation des résultats des échantillons testés. Plusieurs étapes manuelles se succèdent au cours de l’étape analytique, chronophages et exposant à un risque de croisement des tubes : une méthode de travail rigoureuse comprenant plusieurs auto-contrôles sont systématiquement réalisés. Le laboratoire IHE de l’EFS AURA s’apprête à optimiser l’automatisation de toutes les étapes d’extraction et d’amplification de l’ADN permettant un gain de temps et de sécurité du processus.