The main objective of the study is to develop a suitable and rapid UPLC/PDA method by coupling online to Quadrupole Dalton analyzer (QDa), a mass detector for the identification and impurity profiling of Brimonidine Tartrate (BRIM)/Timolol maleate (TIMO) in the ophthalmic formulation. Chromatographic separation was achieved on ethylene bridged hybrid octadecylsilane column having 1.7μm particle size in gradient mode using high pure heptafluorobutyric acid as a buffer (A) and water, methanol, and acetonitrile (B) as mobile phase with a flow rate of 0.3mlmin^-1. Based on the spectral maxima, BRIM and its impurities were monitored at 248nm, and TIMO and its impurities were monitored at 295nm. During evaluation of stress conditions and stability data unknown degradants are observed and identified as m/z 218.01 (DP1) and m/z 390.03 (DP2) using QDa-ESI+ scanning mode technique. The performance of the method was systematically validated according to ICH Q2 (R1) guidelines and the method shown very good sensitivity (≥0.5μg.mL⁻¹) and linearity (r²≥0.999) with consistent recoveries and less than 5% RSD for all compounds. Hence, the proposed UPLC/PDA/QDa method is a simple, sensitive and comprehensive technique where identification and quantification can be done. It gives for complete impurity profile evaluation of BRIM/TIMO in the ophthalmic formulation during quality control in the pharmaceutical industry.

L’objectif principal de l’étude est de développer une méthode UPLC / PDA adaptée et rapide en couplant en ligne à l’analyseur Quadrupole Dalton (QDa), un détecteur de masse pour l’identification et le profilage des impuretés du tartrate de brimonidine (BRIM) / maléate de timolol (TIMO) dans la formulation ophtalmique. La séparation chromatographique a été réalisée sur une colonne d’octadécylsilane hybride pontée par l’éthylène ayant une taille de particule de 1,7μm en mode gradient en utilisant de l’acide heptafluorobutyrique de haute pureté comme phase mobile A et de un mélange eau, méthanoll, acétonitrile comme phase mobile B en tant que phase mobile avec un débit de 0,3 mL min^-1. Sur la base des maxima spectraux, BRIM et ses impuretés ont été détectés à 248 nm, et TIMO et ses impuretés ont été détectés à 295nm. Lors de l’évaluation des conditions de contrainte et des données de stabilité, des dégradants inconnus sont observés et identifiés comme m / z 218,01 (DP1) et m / z 390,03 (DP2) en utilisant la technique du mode de balayage QDa-ESI +. La performance de la méthode a été systématiquement validée selon les recommandations ICH Q2 (R1) et la méthode a montré une très bonne sensibilité (≥0,5 μg. ML-1) et une linéarité (r²≥0,999) avec des récupérations cohérentes et une RSD inférieure à 5 % pour tous les composés. Par conséquent, la méthode UPLC / PDA / QDa proposée est une technique simple, sensible et complète dans laquelle l’identification et la quantification peuvent être effectuées. Elle permet ainsi l’évaluation complète du profil d’impureté de BRIM / TIMO dans la formulation ophtalmique lors du contrôle de qualité au niveau de l’industrie pharmaceutique.