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Impact of submerged culture conditions on growth and bioactive metabolite produced by endophyte Hypocrea spp. NSF-08 isolated from Dillenia indica Linn. in North-East India - 19/04/08

Doi : 10.1016/j.mycmed.2007.10.006 
D.K. Gogoi , S. Mazumder, R. Saikia, T.C. Bora
Biotechnology division, North-East Institute of Science and Technology (CSIR), Jorhat-785006, Assam, India 

Corresponding author.

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Summary

An endophytic fungus, associated with tropical tree species Dillenia indica Linn., has a broad-spectrum antimicrobial property against human and plant pathogenic microorganisms. The fungus was identified as Hypocrea spp. NSF-08, a teleomorphic genus of Trichoderma, based on morphological, sporulation and molecular characteristics. The effect of various culture conditions, supplementary carbon, nitrogen sources and amino acid amendment on growth and antimicrobial agent production by the fungus was determined. The basal medium, enriched with glycerol (2%) as carbon source and ammonium nitrate as nitrogen source, promoted the biosynthesis of secondary metabolite. Optimum temperature required for maximum production of antimicrobial agent was 25°C and pH 5.5, respectively, in an incubation period of eight days, while specific rate of product formation was at maximum on the 4th day. Amendment of amino acid alanine with glucose and glutamic acid in combination with glycerol, sucrose and fructose enhanced the production of bioactive metabolite by the fungus. The antimicrobial agent produced by Hypocrea spp. was extracted with ethyl acetate as solvent and purified by TLC. The purified active compound with UV λ-max 242nm got the lowest minimum inhibitory concentration (MIC) against Staphylococcus aureus and Fusarium oxysporum, whereas no activity recorded against Pseudomonas aeruginosa.

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Résumé

Un champignon endophyte, isolé d’un arbre tropical, Dillenia indica Linn., possède un large spectre d’activité antimicrobienne contre des microorganismes pathogènes pour l’homme et pour les plantes. Ce champignon est identifié sur des critères morphologiques et moléculaires comme Hypocrea sp. NSF-08, un genre téléomorphe de Trichoderma. Les effets de diverses conditions de culture, sources de carbone, d’azote et d’acides aminés, sont évalués sur sa croissance et sa production de métabolites antimicrobiens. Le milieu de base, enrichi par du glycérol (2 %) comme source de carbone et de nitrate d’ammonium comme source d’azote, développe la synthèse de métabolites secondaires. La température et le pH optimum requis pour la biosynthèse d’agents antimicrobiens est de 25̊C et de 5,5 respectivement, avec la production d’un taux spécifique maximum au quatrième jour. L’apport d’alanine et d’acide glutamique en combinaison avec le glycérol, le glucose, le sucrose et le fructose augmente la production de métabolite bioactif par ce champignon. L’agent antimicrobien produit est extrait par l’acétate d’éthyle et purifié par chromatographie en couches minces (CCM). Le composé purifié avec un UV λ-max à 242 nm donne la plus faible concentration minimale inhibitrice (CMI) contre Staphylococcus aureus et Fusarium oxisporum, alors qu’il n’a aucune activité contre Pseudomonas aeruginosa.

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Keywords : Endophyte, Hypocrea spp. NSF-08, Antimicrobial agent, Minimum inhibitory concentration

Mots clés : Hypocrea sp. NSF-08, Endophyte, Composé antimicrobien, Concentration minimale inhibitrice


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Vol 18 - N° 1

P. 1-9 - mars 2008 Regresar al número
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