Objectifs. - Cette étude pose la question de savoir si les antigènes reconnus par les autoanticorps antinucléaires sont exposés par apoptose.

Matériel et méthodes. - L'apoptose des cellules HEp-2 était induite par de la camptothécine ; l'apoptose était évaluée par fragmentation de l'ADN et par mesure de l'expression de FasL et de Bax. Les autoantigènes étaient détectés par immunofluorescence indirecte et par Western-blot avec des autoanticorps ou des monoclonaux dirigés contre l'ADN, Ro60, La, U1-RNP, CENP-B, l'ADN topo-isomérase I, Jo-1 et NuMA. Une comparaison de la réactivité des anticorps antinucléaires entre les cellules vivantes et les cellules en apoptose était réalisée par ELISA.

Résultats. - Des modifications liées à l'apoptose, telles que la fragmentation de la chromatine, les bulles et les corps apoptotiques, étaient induites par 20 mM de camptothécine. Les autoantigènes étaient mieux détectés dans les cellules en apoptoses. Les antigènes U1-RNP, Jo1, DNA-Topo-isomérase I, CENP-B et NuMA étaient fragmentés et redistribués après apoptose ; en revanche, Ro60 et la ribonucléoprotéine La n'étaient pas protéolysés. De plus, les titres d'anticorps antinucléaires mesurés par ELISA étaient plus élevés dans les cellules apoptotiques que dans les cellules normales.

Conclusion. - L'apoptose induit des modifications de différents autoantigènes, induisant la formation d'autoanticorps tels que les anti-RNP, les anti-ADN Topo-isomérase I, les anti-CENP-B et les anti-Jo1. Les modifications liées aux phénomènes d'apoptose contribueraient à une rupture de tolérance dans les maladies auto-immunes systémiques.

Objectives. - Present study addresses the issue whether cellular antigens recognized by antinuclear autoantibodies are driven by apoptosis.

Material and methods. - HEp-2 cells were committed to apoptosis bycamptothecin; DNA fragmentation and FasL and Bax expression monitored apoptosis. Autoantigens were probed by indirect immunofluorescence and Western-blot with autoantibodies or monoclonals against: DNA, Ro60, La, U1-RNP, CENP-B, DNA Topoisomerase I, Jo-1 and NuMA. A comparison of antinuclear antibody reactivity between living and apoptotic cells was performed by ELISA.

Results. - Apoptotic changes such as chromatin fragmentation, blebs and apoptotic bodies were induced with 20mM camptothecin. Autoantigens were better detected in apoptotic cells. U1-RNP, Jo1, DNA-Topoisomerase I, CENP-B and NuMA exhibited fragmentation and redistribution as consequence of apoptosis; in contrast, Ro60 and La ribonucleoproteins did not show proteolysis. Additionally the ELISA titers of antinuclear antibodies were higher in apoptotic cells than in normal cells.

Conclusion. - Apoptosis induce molecular changes in different autoantigens, this modification increases the antigen driven response of autoantibodies such as anti-RNP, anti-DNA Topoisomerase I, anti-CENP-B and anti-Jo1. Apoptotic changes would contribute to brake down the tolerance in auto-immune connective tissue disease.