Se debe sospechar una anemia hemolítica en un paciente que presente un síndrome anémico asociado a ictericia y/o esplenomegalia. La hemólisis se confirma por el carácter regenerativo de la anemia y el aumento de la bilirrubina libre y de las lactato deshidrogenasas plasmáticas, asociado a un nivel bajo o indetectable de haptoglobina sérica. El proceso de diagnóstico ante una anemia hemolítica en la que se ha descartado una causa inmunitaria sigue una estrategia rigurosa. El análisis del contexto puede apuntar de inmediato a una causa tóxica, séptica o a la malaria. En caso de hemólisis aguda, también hay que considerar la posibilidad de una hemólisis tóxica por medicamentos. Puede producirse bien como consecuencia de un déficit enzimático preexistente o de una hemoglobina inestable subyacente, bien sin que exista ninguna anomalía genética en los eritrocitos. La anamnesis es fundamental para detectar la toma de medicamentos oxidantes que puedan provocar hemólisis en una persona con deficiencia de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa. Una vez superado el episodio hemolítico, se debe realizar una prueba para detectar una anomalía en una enzima de la vía de las pentosas o una inestabilidad de la hemoglobina. Se debe considerar la posibilidad de una hemólisis mecánica en caso de trombocitopenia y confirmarla mediante la presencia de esquizocitos. Fuera de un contexto agudo, el diagnóstico etiológico se basa en el frotis de sangre, que puede aportar indicaciones importantes. Si el resultado del frotis sanguíneo es normal, la anamnesis puede, en efecto, apuntar a una anomalía constitucional en caso de antecedentes personales de episodios de ictericia, esplenomegalia o esplenectomía. En esta fase, en función de la orientación clínica, se recomienda realizar pruebas para detectar esferocitosis mediante citometría o ectacitometría, hemoglobinuria paroxística nocturna mediante citometría de flujo y la determinación de las enzimas eritrocíticas.