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Molecular identification of dermatophytes isolated in Sfax-Tunisia - 08/06/10

Doi : 10.1016/j.mycmed.2010.01.004 
S. Neji, F. Makni, H. Sellami, F. Cheikhrouhou, A. Sellami, A. Ayadi
Laboratory of fungal and parasitological molecular biology research, School of Medicine, 3029 Sfax, Tunisia 

Corresponding author.

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Summary

Recently, molecular techniques have been developed for rapid and accurate alternative identification of dermatophyte.

Objective

The objective was to investigate PCR sequencing for identification of common dermatophyte species.

Materials and methods

Twenty-four samples were taken from patients with dermatophytosis. Mycological identification revealed: Trichophyton rubrum (13), Trichophyton mentagrophytes (seven), Microsporum sp. (two) and negative culture (two). PCR sequencing of chitin synthase1 gene from culture was applied for 17 strains and directly from samples for seven cases.

Results

PCR amplification of CHS1 gene gave a 450bp fragment. Sequencing showed 97 to 99% identity. Identification of our strains by conventional methods was confirmed by PCR sequencing in 83.3% of cases. Two isolates of Microsporum sp. were reclassified as M. ferrugineum. In the two cases with negative culture, direct PCR sequencing has detected T. mentagrophytes.

Conclusion

PCR sequencing provided excellent tool for identifying strains that do not present typical morphological characteristics. It was also able to give correct identification of the first isolates of M. ferrugineum in Tunisia.

El texto completo de este artículo está disponible en PDF.

Résumé

Récemment, les techniques moléculaires ont été développées comme des alternatives rapides et précises d’identification des dermatophytes.

Objectif

Notre objectif a été d’appliquer le séquençage de produits PCR pour l’identification des espèces de dermatophytes les plus fréquentes.

Matériels et méthodes

Vingt-quatre échantillons ont été prélevés chez des patients atteints de dermatomycoses. L’identification mycologique a révélé : Trichophyton rubrum (13), Trichophyton mentagrophytes (sept), Microsporum sp. (deux) et culture négative (deux). Le séquençage d’amplicons PCR du gène de la « chitine synthase 1 » à partir de la culture a été appliqué pour 17 souches et directement à partir du prélèvement pour sept cas.

Résultats

L’amplification par PCR du gène CHS1 a permis d’obtenir un fragment de 450pb. Le séquençage a montré 97 à 99 % d’identité. L’identification de nos souches par les méthodes conventionnelles a été confirmée par PCR séquençage dans 83,3 % des cas. Deux isolats de Microsporum sp. ont été reclassés comme M. ferrugineum. Dans les deux cas de culture négative, le séquençage de produits PCR appliqué directement à partir des squames a détecté T. mentagrophytes.

Conclusion

Le séquençage de produits PCR a fourni un excellent outil pour l’identification des souches qui ne présentent pas des caractéristiques morphologiques typiques. Il a été aussi capable de donner l’identification correcte des premiers isolats de M. ferrugineum en Tunisie.

El texto completo de este artículo está disponible en PDF.

Keywords : Dermatophytes, PCR sequencing, Chitin synthase gene

Mots clés : Dermatophytes, Séquençage de produits PCR, Gène de la chitine synthase


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Vol 20 - N° 2

P. 85-90 - juin 2010 Regresar al número
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