Le test de Kleihauer est un test cytochimique sur frottis sanguin permettant de détecter et de quantifier les hématies fœtales dans le sang maternel en cas de suspicion d'hémorragie fœtomaternelle au cours de la grossesse ou de l'accouchement. Ce test est fondé sur la différence de solubilité en milieu acide de l'hémoglobine fœtale par rapport à l'hémoglobine adulte. Le test de Kleihauer est indiqué pour diagnostiquer, quantifier et suivre l'évolution d'une hémorragie fœtomaternelle (HFM). Le résultat du test de Kleihauer permet également d'adapter la posologie des immunoglobulines anti-D dans le cadre de la prophylaxie ciblée et systématique de la femme enceinte RH1 négatif du risque d'allo-immunisation fœtomaternelle. Le test de Kleihauer est toujours l'examen biologique de référence du diagnostic direct de l'HFM, car il devient positif dans ce cas avant les autres examens complémentaires. Le test de Kleihauer est sensible, rapide et a une bonne valeur prédictive négative. Dans un faible pourcentage de cas, le test de Kleihauer est ininterprétable en raison de la présence d'hématies maternelles possédant un contenu élevé en hémoglobine fœtale (HbF). Toutefois, le test de Kleihauer est une technique manuelle mal standardisée et sa reproductibilité et sa justesse sont médiocres. Or, il est cependant nécessaire d'obtenir le résultat quantitatif le plus précis possible, car ce dernier permet d'évaluer le volume de l'HFM afin, d'une part, d'estimer la sévérité de l'hémorragie et, d'autre part, d'adapter la posologie d'immunoglobulines anti-D à administrer dans la prévention de l'allo-immunisation maternelle. Ainsi, pour le biologiste à l'heure de l'accréditation, la réalisation et la lecture d'un test de Kleihauer nécessiteraient une meilleure standardisation interlaboratoires ainsi que des contrôles de qualité renforcés. Pour ces raisons, des techniques alternatives plus précises de quantification des hématies fœtales par cytométrie en flux sont en cours de développement.