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Antifungal activity of a soil isolate of Pseudomonas chlororaphis against medically important dermatophytes and identification of a phenazine-like compound as its bioactive metabolite - 11/06/14

Activité antifongique d’un isolat tellurique de Pseudomonas chlororaphis vis-à-vis des dermatophytes pathogènes et l’identification d’un composé de type phénazine comme son métabolite actif

Doi : 10.1016/j.mycmed.2014.01.117 
A. Ranjbariyan a, M. Shams-Ghahfarokhi a, , M. Razzaghi-Abyaneh b
a Department of Mycology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran 14115-331, Iran 
b Department of Mycology, Pasteur Institute of Iran, Tehran 13164, Iran 

Corresponding author.

Summary

Objective

The increasing importance of dermatophytoses and emerging resistance of dermatophytes to current synthetic antifungals have stimulated the search for safer and more effective alternative drugs from natural sources. The present study was carried out to identify antagonistic bacteria of soil origin with strong inhibitory activities on the growth of major human pathogenic dermatophytes.

Materials and methods

Antifungal activity of isolated soil bacteria was screened against the dermatophytes from three genera Microsporum (M. canis, M. gypseum), Epidermophyton (E. floccosum) and Trichophyton (T. mentagrophytes, T. rubrum, T. violaceum, T. tonsurans) by using visual plate agar assay method. A Pseudomonas chlororaphis isolate S105, identified at the species level by 16S ribosomal RNA sequence analysis, was reported as the strongest antagonistic bacterium. P. chlororaphis S105 culture supernatant (PCCS) was examined against tested dermatophytes by GY (glucose-yeast extract) broth bioassay in 6-well microplates. Antifungal compound of the bacterium was partially purified from the culture supernatant through a purification scheme of methanol extraction, Diaion HP20 ion-exchange chromatography and preparative thin layer chromatography.

Results

P. chlororaphis S105 was the most potent inhibitor of fungal growth for all tested dermatophytes with a percent inhibition ranged from 57.1% to 99.8%. The PCCS suppressed the growth of all fungi tested in the range of 18.5% to 84.8%. Partially purified antifungal compound of the bacterium was identified as a phenazine-like compound with an Rf value of 0.51. The compound inhibited fungal growth by 73.6% to 97.9% on GY broth. Fungal growth inhibition was significant for all dermatophytes tested in comparison with the controls (Anova, P<0.05).

Conclusion

With respect to the strong inhibitory activity of P. chlororaphis against pathogenic dermatophytes reported here, it may be considered as a rich source of useful metabolites with potential application in antifungal drug discovery.

El texto completo de este artículo está disponible en PDF.

Résumé

Objectif

L’importance croissante des dermatophytes et l’émergence de la résistance de ces champignons aux antifongiques de synthèse actuels ont stimulé la recherche de médicaments plus efficaces provenant de sources naturelles. La présente étude a été réalisée pour identifier des bactéries antagonistes d’origine tellurique avec de fortes activités inhibitrices sur la croissance des principaux dermatophytes pathogènes pour l’homme.

Matériel et méthodes

L’activité antifongique de certaines bactéries d’origine tellurique a été testée contre des dermatophytes appartenant aux trois genres Microsporum (M. canis, M. gypseum), Epidermophyton (E. floccosum) et Trichophyton (T. mentagrophytes, T. rubrum, T. violaceum, T. tonsurans) en utilisant une méthode visuelle sur gélose. L’isolat S105, identifié comme Pseudomonas chlororaphis par séquençage des gènes de l’ARN ribosomial 16S, s’est révélé être le plus actif sur ces champignons. Le surnageant de culture de P. chlororaphis S105 (SCPC) a été testé contre les dermatophytes étudiés en milieu liquide glucose-extrait de levures (bouillon GY), en plaques de microtitration 6 puits. Le composé bactérien antifongique a été partiellement purifié à partir du surnageant de culture par extraction au méthanol, suivie d’une chromatographie échangeuse d’ions sur Diaion HP20 et enfin d’une chromatographie sur couche mince préparative.

Résultats

L’isolat P. chlororaphis S105 est le plus puissant inhibiteur de la croissance des dermatophytes étudiés avec un pourcentage d’inhibition allant de 57,1% à 99,8%. Le SCPC réduit de manière significative la croissance de tous les champignons testés de 61,5% à 84,8%. Le composé bactérien supportant l’activité antifongique a été identifié comme un dérivé de la phénazine avec un Rf de 0,51. Le composé partiellement purifié inhibe de 73,6% à 97,9% la croissance fongique en bouillon GY. Par comparaison avec les témoins, l’inhibition de la croissance fongique est significative pour tous les dermatophytes étudiés (Anova, p<0,05).

Conclusion

Compte tenu de la forte activité inhibitrice de P. chlororaphis vis-à-vis des dermatophytes étudiés, cet isolat peut être considéré comme une source intéressante de métabolites avec des applications potentielles dans le domaine antifongique.

El texto completo de este artículo está disponible en PDF.

Keywords : Pseudomonas chlororaphis, Phenazine-like compound, Dermatophytes, Antifungal activity, Molecular identification

Mots clés : Pseudomonas chlororaphis, Composé de type phénazine, Dermatophytes, Activité antifongique, Identification moléculaire


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