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Intérêt du séquençage haut-débit (NGS) sur prélèvements d’air pour la caractérisation de l’exposition fongique domiciliaire - 31/08/15

Doi : 10.1016/j.mycmed.2015.06.013 
Pierre Le Cann 1, 2, Delphine Méheust 1, 2, Tina Reponen 3, Stephen Vesper 4, Jean-Pierre Gangneux 2, 5,
1 École des hautes études de santé publique (EHESP), 35043 Rennes, France 
2 UMR Inserm 1085 IRSET, 35000 Rennes, France 
3 University of Cincinnati, Department of Environmental Health, OH 45267-0056 Cincinnati, États-Unis 
4 Environmental Protection Agency, OH 45267-0056 Cincinnati, États-Unis 
5 Laboratoire de parasitologie-mycologie, faculté de médecine, Inserm U1085-IRSET, 35000 Rennes, France 

Auteur correspondant.

Resumen

Introduction

Une exposition domiciliaire fongique élevée quantifiée par l’index environnemental moléculaire Environmental Relative Moldiness Index (ERMI) est associée au développement de l’asthme dans l’enfance. Dans ce travail, nous avons utilisé cette technique basée sur la quantification moléculaire de 36 champignons dans les poussières pour comparer sa valeur dans l’air à la détection par séquençage haut-débit NGS.

Matériels et méthodes

Des prélèvements de poussière et d’air ont été collectés dans 20 logements étiquetés « moisis » et 20 logements « non moisis » par les méthodes suivantes : 2 m2 de poussières prélevées à l’aide d’un embout Mitest™ positionné sur un aspirateur ; 3 m3 d’air prélevés par le collecteur cyclonique Coriolis® (Bertin Technologies, France). Tout d’abord, nous avons validé l’ERMI dans l’air versus les poussières, puis comparé dans les prélèvements d’air l’ERMI le séquençage NGS (10 échantillons « moisis » versus 10 échantillons « non moisis »). La cible était le gène 18S séquencé par pyroséquençage à l’aide du système Roche 454.

Résultats et discussion

Une corrélation entre l’ERMI « poussières » et l’ERMI « air » a été observée avec une valeur significative du test Kendall's tau. Les moisissures intérieures les plus identifiées étaient Aspergillus restrictus, A. fumigatus, A. versicolor, Aureobasidium pullulans Penicillium crustosum, Wallemia sebi, auxquelles s’associaient des moisissures classiquement d’extérieur, Cladosporium cladosporoides, Cladosporium herbarum. L’analyse des séquences obtenues par pyroséquençage était superposable à l’observation par ERMI. Les 3 genres les plus représentés dans l’air intérieur étaient Aspergillus, Penicillium et Cladosporium. Toutefois, quelques genres non inclus dans le panel ont pu être détectés en quantité non négligeable, à l’image des levures notamment du genre Cryptococcus. L’ERMI et le NGS apparaissent donc utiles et corrélés pour la quantification de la charge fongique environnementale dans l’air. L’ERMI a l’avantage d’être une technique rapide, mais sa limite est de cibler a priori 36 genres fongiques (définis initialement aux États-Unis). L’analyse NGS permet d’identifier d’autres genres potentiellement pertinents et donc d’adapter les cibles pour un ERMI « français ».

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Vol 25 - N° 3

P. 222 - septembre 2015 Regresar al número
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  • Sérologie aspergillaire : résultats de l’enquête SFMM auprès d’experts français
  • F. Persat, J.P. Gangneux, C. Hennequin, Groupe sérodiagnostic fongique de la Société française de mycologie médicale
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  • Quand un contrôle qualité s’installe dans un climatiseur ou l’histoire d’une souche d’Aspergillus fumigatus démasquée par son spectre de masse
  • Anne-Cécile Normand, Farid Djenad, Stéphane Ranque, Renaud Piarroux

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