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Le phospho-FACS : un outil puissant d'exploration des cascades de transduction intracellulaires - 18/04/08

Doi : RMRF-10-2007-24-8-0761-8425-101019-2007200118 

Y. Gernez [1],

L.A. Herzenberg [1],

L.A. Herzenberg [1],

R. Tirouvanziam [1]

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Résumé

Introduction

Le FACS (fluorescence-activated cell sorting), ou cytométrie en flux, a été développé en 1971 par l'équipe de Leonard Herzenberg à l'Université de Stanford. Sans cesse perfectionnée, cette technologie permet l'analyse et le tri unicellulaire en fonction de multiples paramètres, tels que les propriétés physiques des cellules ou leurs niveaux relatifs d'expression d'épitopes glyco-protéiques et de métabolites.

État des connaissances

Récemment, l'utilisation d'anticorps fluorescents spécifiques pour les formes phosphorylées de protéines d'intérêt, ou « phospho-épitopes », a permis d'étendre le champ d'application du FACS. Cette nouvelle application, dénommée « phospho-FACS », est rapidement devenue un outil de prédilection pour l'étude des cascades de phosphorylation intracellulaires.

Perspectives

En recherche fondamentale ou clinique, l'application du phospho-FACS à l'étude de sous-populations sanguines ou périphériques, fréquentes ou rares, permet la découverte de marqueurs pathologiques et l'innovation thérapeutique.

Conclusions

De par sa rapidité d'implémentation et sa capacité d'analyse à l'échelle de la cellule unique, le phospho-FACS présente de nombreux avantages comparés aux techniques préexistantes d'étude des cascades de phosphorylation.

Abstract

Phospho-FACS: a powerful tool for exploring intracellular transduction cascades

Introduction

FACS (fluorescence-activated cell sorting), or flow cytometry, was developed in 1971 by Leonard Herzenberg's team at Stanford University. Under continuous development, this technology enables single-cell multiparametric analysis and sorting, based on physical properties of cells and/or their relative expression levels of specific glycoproteic epitopes and metabolites.

State of the art

Recently, the use of fluorescent antibodies specific for phosphorylated epitopes – or "phospho-epitopes" – within proteins of interest has further extended the range of FACS analyses. This new application, dubbed "phospho-FACS", has quickly become a tool of choice for delineating intracellular phosphorylation cascades.

Perspectives

In both basic research and clinical research, the application of phospho-FACS to cellular subsets from blood or the periphery, whether frequent or rare, enables the discovery of pathological biomarkers and therapeutic innovation.

Conclusions

Thanks to its rapid implementation and its ability to generate single-cell data, the phospho-FACS technique features numerous advantages compared to preexisting analytical methods for intracellular phosphorylation cascades.


Mots clés : Inflammation , Kinases , Transduction du signal

Keywords: Inflammation , Kinases , Signal transduction


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Vol 24 - N° 8

P. 955-964 - octobre 2007 Retour au numéro
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